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[农学]预处理和固液分离
生物反应过程示意图 概述 概述 生物分离过程的一般流程 概述 一、悬浮液的预处理 预处理的目的 预处理的方法 凝聚与絮凝 絮凝 凝聚和絮凝在发酵液预处理中的应用 高分子絮凝剂的吸附架桥作用 常用的絮凝剂 加入助滤剂 一种不可压缩的多孔微粒,能使滤饼疏松、滤速增大 常用的助滤剂有硅藻土、纤维素、石棉粉、珍珠岩等 加入方法:过滤介质表面预涂助滤剂 直接加入发酵液 两法兼用 加入反应剂 加入某些不影响目的产物的反应剂,可消除发酵液中某些杂质对过滤的影响,提高滤速。 如CaSO4、AlPO4等可与某些盐类发生反应生成不溶性沉淀,生成的沉淀能防止菌丝体粘结,使菌丝具有块状结构,沉淀本身可作为助滤剂,并能使胶状物和悬浮物凝固,改善过滤性能。 1.杂蛋白质的去除 1)沉淀 蛋白质为两性物质,可与阴离子或阳离子形成沉淀 或者等电点沉淀 2)变性 蛋白质从有规则的排列变成不规则结构的过程称为变性。变性蛋白质溶解度较小。 最常用加热。加热还能使液体粘度降低,加快过滤速度。 有机溶剂等电点沉淀 3)吸附作用 2.高价无机离子的去除 用磷酸盐处理,也能大大降低钙离子和镁离子的浓度。如环丝氨酸的提取 要除去铁离子,可加入黄血盐,使形成普鲁士蓝沉淀 三、发酵液的固液分离 1.离心分离 所用设备使离心机,其是利用转鼓高速转动所产生的离心力,来实现悬浮液、乳浊液分离或浓缩的分离机械。 离心力场所产生的离心力可以比重力高几千至几十万倍,其可分离悬浮液中极小的固体微粒和大分子物质。 过滤式离心机和沉降式离心机 2.过滤 传统的化工单元操作,其操作是借助于过滤介质,在一定的压力差ΔP作用下,将悬浮液中的固体粒子截留,而与液体分离的技术。衡量过滤特性的主要指标是滤饼的重量比阻rB,它表示单位滤饼厚度的阻力系数,与滤饼的结构特性有关。对于不可压缩性滤饼,比阻值为常数,但对于可压缩性滤饼,比阻rB,是操作压力差的函数 根据滤饼的重量比阻值,可衡量各种不同发酵液过滤的难易程度。一般,真菌的菌丝比较粗大,如青霉素的重量比阻为(0.15一0.20)× l012 m/kg左右,发酵液容易过滤,常不需特殊处理。放线菌发酵液菌丝细而分枝,交织左右,过滤较困难,一般需经预处理成网络状,如链霉素重量比阻为2000×1012m/kg 。 根据过滤机理的不同,可分为澄清过滤和滤饼过滤。 澄清过滤中,所用介质为硅藻土、砂、颗粒活性炭、玻璃珠等,过滤介质起主要过滤作用。 滤饼过滤中,过滤介质为滤布,固体颗粒被滤饼所阻拦而形成的滤饼起主要的过滤作用 按滤液的流动方向不同,分为封头过滤(常规过滤)和错流过滤(切向流过滤、交叉过滤、十字流过滤) 常规过滤中滤液流动方向与滤饼垂直 常用过滤设备 板框过滤机,传统过滤设备 板框压滤机的过滤推动力来自泵产生的液压或进料贮槽中的气压。 它最重要的特征是通过过滤介质时产生的压力降可以超过0.1MPa,这是真空过滤器无法达到的。 板框压滤机已有很长历史。 真空转鼓过滤机 大规模工业生产,广泛用于霉菌、放线菌和酵母菌发酵液或细胞悬浮液的过滤分离。一般不适于菌体较小和粘度较大的细菌发酵液的过滤。 硅藻土过滤机 板框压滤机 扩张床吸附技术 细胞破碎 第一节 概述 第二节 细胞破碎 第一节 概述 分离的对象:动物细胞培养液、植物细胞培养液、微生物发酵液、动物血液、乳液、动物植物组织提取液等。有共同的性质: 浓度低 组分复杂 易失活 不稳定 短时、温和 许多生物产物在细胞培养过程中不能分泌到胞外,而保留在细胞内。如一些胞内酶、部分外源基因表达产物和植物细胞产物等。这类生物产物在固液分离后,需对收集到的菌体或细胞进行细胞破碎(Cell disruption),使目标产物释放到液相中。除去细胞碎片后,再进行后续分离纯化操作。 细胞的破碎: 用一定方法(机械法、物理法、化学法、酶法等)打开细胞壁或膜,使细胞的内含物有效地释放出来。 提取: 目的物从胞内转移到外界溶液中。 细胞 (提取剂) 提取液(液体目的物) 沉淀 洗涤 提取物(固体目的物) 第二节 细胞破碎 一、细胞壁的组成和结构 二、破碎率的评价 三、细胞破碎 破碎方法 选择依据 发展方向 不同种类的细胞结构差别很大,破碎的难易程度也不同 一、细胞壁的组成和结构 1、细菌的细胞壁 2、酵母菌的细胞壁 3、其它真菌的细胞壁 二、破碎率的评价 破碎率定义为被破碎细胞的数量占原始细胞数量的百分比数,即 直接测定法
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