[医学]20122009级中药学本科中药药理方剂配伍规律研究思路与实践.ppt

配伍是中医用药的特色和优势所在，开展方剂配伍规律的现代研究是中医药现代化研究的重要组成部分，对于继承和发展中药配伍理论、更有效地指导临床和中药新产品研创具有重要意义，近年国家自然基金曾将中药配伍规律的基础研究列为重点项目。然而，方剂配伍规律研究也是中医药现代研究的难点，其研究思路与方法尚在探索之中。 实验研究 方剂配伍规律研究应以物质基础为核心？ ?方剂物质基础研究的原则 以中医药理论为指导 最大限度运用现代相关技术 以揭示方剂作用原理、配伍内涵为导向 以提高临床疗效、指导新药研创为目的 第五步 综合分析 根据以上结果，综合分析该方产生疗效的物质基础，探讨物质基础的变化与配伍、药理效应间的内在关系 第二部分方剂配伍规律研究实践 葛根芩连汤配伍规律研究 （国家自然科学基金资助项目编 (3) 葛根芩连汤的化学成分分析(煎液、人血清、兔血清) ?通过药效实验结果，反证配伍药物进入药效指标相关的经络 (肺、脾、肠)与单味药的药效结果、归经比较，证实诱导归经的假说。 ?通过药物 3H 指标成分在组织器官的分布，以直接证明配伍对诱导归经定向、定位的影响 ?通过人体药代动力学研究、指标成分吸收、分布代谢参数，佐证诱导归经。 (8) 葛根芩连汤配伍分析和规律的阐述 配伍对葛根芩连汤抗腹泻作用影响 ?方法：家兔福氏2a志贺氏菌实验性菌痢模型 。 ?结果： 黄连、黄芩均能明显减少结肠内容物和结肠组织内细菌定量计数，葛根与甘草则作用不明显。 炙甘草则可以明显降低结肠炎指数，而葛根 、黄芩、黄连则作用不明显，它们对炙甘草的作用也无明显影响。 黄连与甘草配伍，小檗碱、甘草酸含量仅比单煎液低，而抗腹泻作用、体内抑菌、降低结肠炎指数方面仍以黄连甘草为主。 就单一指标来说，全方均非最佳，但同时具有良好的解热、抑菌、抗腹泻等作用，又是各单味药及其他配伍组所不及的，所以从治疗“协热下利”证来说，全方四味药组合最佳。 ?四种成分的含量测定 (指标成分) 在药材中——煎液中——血清中的转移率 (量变) ? 新的化学成分的发现 (配伍前后指纹图谱对比寻 找新成分)(质变) 煎液中新的化合物 (其中包括复合物、盐等) 血清中新的化合物 (次生、代谢产物——如甘草次酸、 黄芩 素等) (4) 建立家兔葛根芩连汤证“协热下利” 证及急性 菌痢病理模型 “协热下利”证模型依据： 《伤寒论》 葛根芩连汤 风寒刺激 白细胞致热源(iv) 生大黄水煎液 止泻、退热 泄泻发热 ＋ (5) 葛根芩连汤化学成分变化(化学成分合和)与 药效的关系 ?家兔“协热下利”证模型 ?家兔急性菌痢病理模型 ?体外抗菌 ?体外抗病毒实验 (6) 葛根芩连汤(指标成分)人体药代动力学研究 通过血清药—时曲线的测定，考察各种配伍对主要成分体内吸收、分布、代谢的影响 (7) 葛根芩连汤归经变化研究(诱导归经) 　　对正交实验设计结果采用多元回归综合分析方法，确定葛根芩连汤的最佳配伍组合；通过对药理效应与相应煎液和血清中多种化学成分变化（量变、质变及归经变化）的相关研究，揭示葛根芩连汤 “相须、相使”的配伍内涵，阐明“七情合和”的实质在于“化学成分合和” 。 (9) 比较优选方与葛根芩连汤原方对“协热下利” 证病人的疗效 各30例病人，随机对照盲法观察。 研究结果 ?方法：HPLC、HPCD法 ?结果： 黄芩苷、小檗碱、甘草酸含量以各单味药煎液含量最高，全方的含量分别占单煎液67%、59%、70%。 各配伍的葛根素含量变化无显著性差异。 葛根、黄连对黄芩苷，葛根、黄芩、甘草对小檗碱 ，黄连对甘草酸的含量均有降低作用。 含黄连、黄芩的配伍煎液中产生的沉淀中含有大量 的黄芩苷。 配伍对葛根芩连汤主要成分含量影响 配伍对葛根芩连汤药理作用影响 配伍对葛根芩连汤体外抑菌作用影响 ?方法：试管二倍稀释法、平皿打孔法。 ?结果： 各配伍组合中，以黄连的体外抑菌活性最强，不同的菌株强度有差异，其次是黄芩，炙甘草对金黄葡萄球菌与志贺氏有弱的抑菌活性，葛根对金黄色葡萄球菌有弱的抑菌活性。 在与黄连配伍中，其余三药均能起拮抗作用。 ?方法：小鼠番泻叶致泻试验，小鼠小肠推进试验。 ?结果： 在抗腹泻药效中，其最佳组合为黄连炙甘草。 葛根与黄芩能拮抗黄连作用，炙甘草增强黄连作用。 配伍对葛根芩连汤解热作用影响 ?方法：大鼠皮下注射埃希氏大肠杆菌悬浮液致 发热试验 。 ?结果： 黄芩有明显的解热作用。 黄连、炙甘草对其黄芩有明显的拮抗作用。 葛根对黄芩有增强的作用 。 配伍对葛根芩连汤抗实验性菌痢的影响 综合分析 葛根与黄芩配伍