[医学]9电位法和永停滴定法2.pptVIP

第9章 电位法和永停滴定法（ potentiometry and dead-stop titration） 9-1 基本原理 9-2 直接电位法 9-3 电位滴定法 9-4 永停滴定法 2. 敏化电极 （1）气敏电极 ＝k× 气敏电极一览表 （2）酶电极 基于界面酶催化化学反应的敏化电极； 酶特性：酶是具有特殊生物活性的催化剂，对反应的选择性强，催化效率高，可使反应在常温、常压下进行； 可被现有离子选择性电极检测的常见的酶催化产物： CO2，NH3，NH4+，CN-，F-，S2-，I-，NO2- 尿素酶 如 CO(NH2 )2 + H2O ──→ 2NH3 + CO2 氨电极检测 葡萄糖 + O2 + H2O ────→ 葡萄糖酸 + H2 O2 氧电极检测 R-CHNH2 COO- +O2 +H2 O ────→ -COCOO- +NH4+ +H2 O2 氨基酸通过以上反应后检测，或进一步氧化放出 酶电极的制作中，酶的固定是关键，它决定了酶电极的使用寿命，并对灵敏度，重现性等性能影响很大。 组织电极的酶源与测定对象一览表 （三）离子选择电极的性能 Nernst响应线性范围和 检测下限 2. 选择性 例题1： 用pNa玻璃膜电极（KNa+，K+= 0.001）测定pNa=3的试液时,如试液中含有pK=2的钾离子,则产生的误差是多少? 解: 误差%=(KNa+，K+× aK+ )/aNa+×100% =(0.001×10－2)/10－3×100% =1% 三、定量分析的条件和方法 1. 定量条件 离子强度 酸度 离子强度调节剂 pH缓冲溶液 干扰离子 掩蔽剂 总离子强度调节缓冲剂（TISAB） total ionic strength adjustment buffer 2. 定量方法 （1）两次测量法 （2）标准曲线法 线性回归方程 （3）标准加入法 * * 9-2 直接电位法 一、溶液的pH测定 指示电极 参比电极 原电池 原电池的电动势 电位 差计 目前最常用的指示电极是pH玻璃电极 （一）pH 玻璃电极 1906年，M. Cremer(Z. Biol.,1906,47,562)首先发现玻璃电极可用于测定； 1909年，F. Haber(Z. Phys. Chem., 1909, 67,385)对其系统的实验研究； 30年代，玻璃电极测定pH的方法成为最为方便的方法(通过测定分隔开的玻璃电极和参比电极之间的电位差)； 50年代，由于真空管的发明，很容易测量阻抗为100M?以上的电极电位，因此其应用开始普及； 60年代，对 pH 敏感膜进行了大量而系统的研究，发展了许多对 K+、Na+、Ca2+、Fˉ、NO3ˉ 响应的膜电极并市场化。 玻璃电极是最早使用的膜电极 1. 构造 普通pH玻璃电极： 1. 球状玻璃膜(Na2SiO3，厚0.1mm) 2. 内部溶液（pH 6—7的缓冲溶液和 0.1 mol/L 的KCl内参比溶液 ） 3. 内参比电极(Ag/AgCl) 4. 玻璃（电极）管 5. 静电隔离层 6. 电极导线 复合pH玻璃电极 2. 响应机制 外部试液 a外 内部参比 a内 水化层 水化层 干玻璃 Ag+AgCl 电极膜组成： Na2O(21.4%) Ca2O(6.4%) SiO2(72.2%) 水化凝胶层 Gl-Na+＋ H+ Gl-H＋ ＋ Na＋（玻璃膜） （溶液） （玻璃膜） （溶液） ≡ SiO－H+＋H2O ≡SiO- ＋H3O+ 相界电位的产生 水泡前→干玻璃层 水泡（活化）后 →水化凝胶层 →Na+与H+进行交换 →形成双电层 →产生电位差 →扩散达动态平衡 →达稳定相界电位