[医学]平面色谱法.pptVIP

1 　 平面色谱法 (plane chromatography) 2 1、定义 2、分类：薄层色谱法、纸色谱法、薄层电泳法 3、平面色谱法参数：A、定性参数、B、相平衡参数、C、面效参数、D、分离参数 4、薄层色谱法 A、分类 B、吸附薄层色谱法（吸附剂、展开剂、操作） C、定性和定量分析 D、薄层扫描法 5、纸色谱法 平面色谱法 3 组分在以平面为载体的固定相和流动相之间吸附或分配平衡而进行分离的一种色谱方法，主要包括薄层色谱法和纸色谱法。 薄层色谱法 纸色谱法　 1、定义： 4 2、分类 　　薄层色谱法： 吸附薄层色谱法 分配薄层色谱法 分子排阻薄层色谱法 胶束薄层色谱法 　　纸色谱法:分配 　　薄层电泳法 5 3、平面色谱法参数 定性参数 相平衡参数 面效参数 分离参数 6 A、定性参数1 比移值(Rf值) 溶质移动距离与流动相移动距离之比。（速度之比） Rf =L/L0 L为原点（origin）至斑点中心的距离，L0为原点至溶剂前沿（solvent front）的距离 适宜范围：0.2~0.8 (0.3~0.5最佳) 与组分及色谱条件（固、流、温度、湿度）有关 7 A、定性参数2 相对比移值(relative Rf；Rr) Rr = Rf (i)/Rf (s)=L(i)/L(s) Rr值可以大于1，也可以小于1。 重现性和可比性均比Rf值好，能消除系统误差（参考物质与组分在完全相同的条件下展开） 与组分、色谱条件、参考物质有关。 8 B、相平衡参数 分配系数K= Cs/Cm 容量因子 k= CsVs/CmVm K、k与Rf值的关系： 　　　　　 9 B、相平衡参数 K、k与Rf值关系推导： Rf =L/L0=u/u0 （1-Rf）/ Rf = CsVs/CmVm = K(Vs/Vm) = k 10 在某分配薄层色谱中，流动相、固定相和载体的体积比为Vm:Vs:Vg=3:1:5,溶质在固定相和流动相中的分配系数为0.5,计算它的Rf和k. = 0.86 = 0.16 11 C、面效参数 12 D、分离参数 R 1 分离度 分离数：分离度为1.17时，在Rf =0和Rf =1之间所能容纳的斑点数 SN越大，平面的容量越大 一般薄层板SN10左右 高效薄层板SN20左右 13 在薄层板上分离A、B两组分的混合物，当原点至溶剂前沿距离为16.0cm时，A、B两斑点质量重心至原点的距离分别为6.9cm和5.6cm,斑点直径分别为0.83cm和0.57cm,求两组分的分离度及Rf值。 = 2 14 1、定义 2、分类：薄层色谱法、纸色谱法、薄层电泳法 3、平面色谱法参数：A）定性参数、B）相平衡参数、C）面效参数、D）分离参数 4、薄层色谱法 A、分类 B、吸附薄层色谱法（吸附剂、展开剂、操作） C、定性和定量分析 D、薄层扫描法 5、纸色谱法 平面色谱法 15 4、薄层色谱法 (thin layer chromatography；TLC) 固定相（吸附剂或载体）涂布成一均匀薄层，点样，（密闭的容器中）展开，斑点显色，（与对照物质）比较进行定性定量。 16 特点： 快，需十至几十分钟，同时展开多个试样。 试样预处理简单，对试样限制少。 载样量比较大，适用于制备。 仪器简单，操作方便。 分离能力较强。 17 A、薄层色谱法的主要类型和原理 吸附薄层色谱法 　　原理：组分在薄层板上吸附、解吸附、 再吸附、再解吸附的过程。 吸附系数不等实现分离。 　　一般极性强的组分K大，Rf值小；极性弱的组分 K小，Rf值大。 18 薄层色谱法的主要类型和原理 分配薄层色谱法 原理：多次分配的过程，分配系数（溶解度）不等实现分离 分类：正相色谱、反相色谱 19 薄层色谱法的主要类型和原理 分配薄层色谱法 正相色谱：水为固定相（硅胶载体），有机溶剂为流动相。 极性强的组分K大， Rf值小。 反相色谱：烷基化学键合相为固定相，水－有机溶剂为流动相。 极性强的组分K小， Rf值大。 20 1、定义 2、分类：薄层色谱法、纸色谱法、薄层电泳法 3、平面色谱法参数：A）定性参数、B）相平衡参数、C）面效参数、D）分离参数 4、薄层色谱法 A、分类 B、吸附薄层色谱法（吸附剂、展开剂、操作） C、定性和定量分析 D、薄层扫描法 5、纸色谱法 平面色谱法 21 B、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂 吸附剂 硅胶：多孔性微粒，表面带有硅醇基，呈弱酸性。 原理：硅醇基(吸附中心)与极性基团形成氢键（吸附性）。通过组分与硅醇基形成氢键（被吸附）的能力不同而