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第四章 微生物的生理 第一节 微生物的酶 一、酶的组成 酶的概念：生物催化剂。细胞中自己制成，基本成分是蛋白质。 一、酶的组成 重要的辅酶和辅基有铁卟啉、辅酶A（CoA或CoA-SH）、NAD+（辅酶Ⅰ）和NADP+（辅酶Ⅱ）、FMN（黄素单核苷酸）和FAD（黄素腺嘌呤二核苷酸）、辅酶Q（CoQ）、腺苷磷酸及其他核苷酸类（包括AMP、ADP、ATP、GTP等）。如 1.氨基酸 与所有的蛋白质一样，酶蛋白也是由氨基酸组成的。在生物体中的蛋白质，由20种氨基酸组成： Ala（丙氨酸） Arg（精氨酸） Asn（天冬酰胺） Asp（天冬氨酸） Cys（半胱氨酸 ） Gln（谷氨酰胺) Glu（谷氨酸） Gly（甘氨酸） His（组氨酸） Ile（异亮氨酸*） Leu（亮氨酸* ） Lys（赖氨酸* ） Met（甲硫氨酸*） Phe（苯丙氨酸*） Pro（脯氨酸） Ser（丝氨酸*） Thr（苏氨酸） Trp（色氨酸* ） Tyr（酪氨酸） Val（缬氨酸） *为必需氨基酸；组氨酸为半必需氨基酸；其余为非必需氨基酸。 2.肽键 氨基酸之间通过肽键（- NH - CO -）连接成多肽链。多肽链之间或一条多肽链卷曲后相邻的基团之间通过氢键、盐键、酯键、疏水键、范德华引力及金属键等相连接，形成蛋白质的空间结构。 酶蛋白的结构图 3.酶蛋白的结构 一级结构 （primary structure ） 一级结构是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的，各种氨基酸按遗传密码的顺序通过肽键连接起来。 二级结构（secondary structure） 二级结构是指多肽链借助于氢键沿一维方向排列成具有周期性的结构的构象，是多肽链局部的空间结构（构象），主要有α－螺旋、β－折叠、β－转角等几种形式，它们是构成蛋白质高级结构的基本要素。 三级结构（tertiary structure） 三级结构主要针对球状蛋白质而言的，是指整条多肽链由二级结构元件构建成的总三维结构。蛋白质特定的空间构象是由氢键、离子键、偶极与偶极间的相互作用、疏水作用等作用力维持的，疏水作用是主要的作用力。有些蛋白质还涉及二硫键。 胰岛素的三级结构 四级结构（quaternary structure） 亚基是由一条或几条多肽链在三级结构基础上形成的小单位。四级结构是指在亚基和亚基之间通过疏水作用等次级键结合成为有序排列的特定的空间结构。四级结构不是所有的蛋白质都具有。 活性中心内的必需基团 六大类酶 （四）按照酶在生物体内存在的状况划分 　　可分成固有酶和诱导酶： 　　固有酶，也称为组成酶（constitutive enzyme）， 无论培养基中有无它们的底物，这种酶都能形成。 　　诱导酶，也称为适应酶（adaptive emzyme），只有在培养基中存在其底物时才能形成。如在E.coli中的利用乳糖的酶就是适应酶。 酶的命名 1.习惯命名法 习惯命名比较简单，直观，但缺乏系统性，由于应用历史较长，现在还被继续使用。 2.国际系统命名法 国际系统命名法的原则是以酶所催化的整体反应为基础的，规定每种酶的名称应当明确表明酶的底物及催化反应的性质。 例如习惯名称为醇脱氢酶的系统名称为： 醇:NAD+氧化还原酶。 酶与一般催化剂的共同点 在反应前后没有质和量的变化； 只能催化热力学允许的化学反应； 只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平衡点。 六、影响酶反应速率的因素 概念 研究各种因素对酶促反应速度的影响，并加以定量的阐述。 影响因素包括有 酶浓度、底物浓度、pH、温度、 抑制剂、激活剂等。 4） pH对酶反应速度的影响 温度和pH稳定性 温度稳定性——不同温度下保温一段时间后，对酶活性的影响。 pH稳定性——不同pH缓冲液的条件下保温一段时间后，对酶活性的影响。 5）激活剂对反应速度的影响 6）抑制剂对酶反应速度的影响 (一) 不可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活。 * 举例 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) （二） 可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 竞争性抑制作用 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶