[理学]第十二章 蛋白质的生物合成.ppt

蛋白质的生物合成（翻译） Protein Biosynthesis，Translation 一、蛋白质生物合成体系。 二、氨基酸的活化 三、肽链的生物合成过程， 四、蛋白质合成后加工和输送 五、蛋白质生物合成的干扰与抑制 第一节 考核要求 1.掌握蛋白质合成体系。 2.掌握遗传密码及其特点。 蛋白质生物合成体系 原料：20种氨基酸 模板：mRNA 运载体：tRNA 场所：核蛋白体（rRNA与蛋白质构成） 蛋白质因子： 起始因子（initiation factor, IF） 延长因子（elongation factor，EF） 释放因子（release factor，RF） 其他：酶类、ATP、GTP、无机离子等 一、翻译模板mRNA及遗传密码 mRNA是蛋白质生物合成的直接模板 遗传密码表 从mRNA 5?端起始密码子AUG开始到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。通常的ORF包含500个以上的密码子。 1. 连续性(commaless) 　 2. 简并性(degeneracy) 遗传密码的简并性 3. 通用性(universal)也叫普遍性 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。（病毒、真菌、植物、动物） 已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 密码的通用性进一步证明各种生物进化来自同一祖先。 4. 摆动性(wobble)又叫“三中配二”原则 密码子、反密码子配对的摆动现象 五、方向性 密码子和组成密码子的各碱基在mRNA序列中的排列具有方向性，翻译时的阅读方向只能是从5?至3?方向。 二、核蛋白体是蛋白质生物合成的场所 核蛋白体的组成 核蛋白体的组成 三、tRNA tRNA 是活化氨基酸的运载工具及蛋白质生物合成的适配器。 第二节 氨基酸的活化  氨基酸活化是在氨基酰—tRNA合成酶催化下，氨基酸与tRNA结合生成氨基酰-tRNA的过程。需消耗ATP。 氨基酰－ tRNA合成酶具有绝对专一性： 对氨基酸及tRNA都能高度特异识别 具有校正活性：即将任何氨基酰—tRNA错误产物的酯键水解，再换上与密码子相对应的氨基酸。 　 　　　 氨基酰-tRNA的表示方法 二、起始氨基酰-tRNA tRNAiMet：起始tRNA(initiator-tRNA) tRNAMet：肽链延长中携带Met的tRNA tRNAifMet：起始tRNA携带N-甲酰甲硫氨酸（fMet） 第三节 读码顺序从5? AUG开始至3?终止密码结束，肽链合成从N－C端； 氨基酰-tRNA的合成贯彻始终 肽链合成过程： 起始阶段( initiation ) 延长阶段(elongation) 终止阶段(termination ) 一、原核生物肽链合成过程（一）起始阶段 起始是指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)的过程。有多种蛋白质因子参与这一过程，称为起始因子（initiation factor，IF） 原核生物各种起始因子的生物功能 起始复合物的形成过程： 1. 核蛋白体大小亚基分离（IF3，IF1） 2. mRNA在小亚基上定位结合 3. fMet-tRNAifMet结合小亚基（IF2，GTP） 4. 核蛋白体大亚基结合 （二）延长阶段 延长是指在mRNA密码序列的指导下，氨基酸依次进入核糖体并聚合成多肽链的过程。这一过程是在核蛋白体上连续循环进行的，又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle)，每次循环增加一个氨基酸，包括以下三步： 进位（entrance）或注册（registration） 成肽（peptide bond formation） 转位（translocation） 需要延长因子（EF ）和GTP的参与 肽链合成的延长因子 （二）成肽 （三）转位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3`侧移动一个密码子的距离，使mRNA序列上的下一个密码子进入核糖体的A位，而占据A位的肽酰-tRNA相对位移进入核蛋白体P位的过程。而卸载的tRNA则移入E位，A位留空并对应下一组三联体密码，准备适当的氨基酰-tRNA进位而开始下一轮核蛋白体循环。 （三）终止阶段 原核生物肽链合成终止过程 终止密码的辨认：RF 肽链从肽酰-tRNA水解出：RF诱导转肽酶 mRNA、卸载tRNA及RF从核蛋白体脱离 大小亚基解聚：IF-1、IF-3 二、真核生物肽链合成过程（一）起始阶段 核蛋白体大小亚基分离； Met-tRNAiM