[生物学]四川大学生物化学课件 RNA的生物合成.pptVIP

刘皓 Email: liuhaoy@ Cell Phone: 主要内容 第十一章 RNA的生物合成 第十二章 蛋白质的生物合成 第十三章 基因表达调控 第十四章 基因重组与基因工程 第十五章 细胞信息转导 第十一章  RNA的生物合成 （转录） RNA Biosynthesis，transcription 定义： 在RNA聚合酶的催化下，生物体以 DNA为模板合成RNA的过程。 转录产物: mRNA, rRNA, tRNA 不对称转录 在特定的生长发育阶段，转录只在某些DNA 区段进行 DNA双链中仅有一条单链可作为模板指导转 录的进行 ,且模板链并非总在同一条单链上 RNA生物合成体系 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶: RNA聚合酶 (RNA polymerase, RNA-pol) 其他蛋白质因子 第一节 转录的模板和酶 1.模板 (template) 模板链 (template strand) 编码链 (coding strand) 2. RNA聚合酶 (DNA dependent RNA polymerase, RNA-pol) a.原核生物的RNA聚合酶 (以E.coli为例) 　 α2ββ‘ (核心酶,core enzyme)： 　α2ββ＇σ (全酶,holoenzyme) σ亚基：辨认转录起始点 特异抑制剂: 利福平 b.真核生物的RNA聚合酶 RNA-pol Ⅰ: 45S-rRNA RNA-pol Ⅱ: hnRNA RNA-pol Ⅲ: 5S-rRNA,tRNA,snRNA 特异抑制剂: 鹅膏蕈碱 真核生物RNA聚合酶的亚基组成 各有2个不同的分子量超过100 kD的大分子量的亚基 都含有多个小分子量的亚基 某些小分子量的亚基相同，可同时出现在两种或三种酶上 3. RNA聚合酶辨认结合DNA模板的启动子 原核生物的转录单位: 操纵子(operon) 转录过程 起始 (initiation) 延长 (elongation) 终止 (termination) 转录起始 (Initiation) 需要解决两个问题: RNA聚合酶必须准确的结合在转录模板 的启动序列区域 DNA双链解开，其中的一条单链作为转 录模板 转录起始过程: 形成闭合转录复合体：全酶靠σ亚基识别结合启动子序列的-35区, 形成闭合的全酶-DNA复合物 DNA双链打开(开放转录复合体)：全酶随即滑动至-10区，在β’亚基的作用下，启动子区域的DNA双链迅速打开，形成开放转录复合体。 转录起始复合物形成：在转录起始点，RNA聚合酶催化发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物。 转录延长 a. 转录延长的化学反应 RNA聚合酶的反应机制 b. 转录空泡 (transcription bubble) 转录终止 (termination) （1）依赖Rho因子的转录终止 （2）非依赖Rho因子的转录终止 a. Rho works by chasing RNA polymerase and knocking it off the templateb. This is an active process that requires the hydrolysis of ATP. （1）依赖Rho因子的转录终止 依赖Rho因子的转录终止模式： 1.Rho因子辨认结合新生RNA链上的Rho因子识别位点，借助水解ATP获得的能量推动其沿着RNA链由5’-3’端移动到达RNA聚合酶区域，并使RNA聚合酶构象发生变化而停顿； 2.Rho因子利用其解螺旋酶的活性在ATP供能的情况下，使DNA：RNA杂化双链解离，从而使RNA链和RNA聚合酶从转录复合物上脱落下来，转录过程随即终止。 非依赖Rho因子的转录终止模式： 　1.当RNA链延长至接近终止区时，该区域附近的转录产物形成特殊的茎环结构，阻止RNA聚合酶继续向前移动，并促进转录复合物的解体； 　2.茎环结构末端的一段寡聚U与DNA链之间形成的U-A配对极不稳定，亦有助于RNA链从转录复合物上脱落 转录过程 起始 (initiation) 延长 (elongation) 终止 (termination) 真核生物DNA的转录 真核生物的转录单位: 基因 转录起始 a. 启动子 (