[药学]第3章 转录及其调控药学本科-2012.ppt

DNA聚合酶在启动DNA链延长时需要引物存在，而RNA聚合酶不需要引物就能直接启动RNA链的延长。 RNA聚合酶和DNA的特殊序列——启动子(promoter)结合后，就能启动RNA合成。 E.coli的转录起始和延长 转录过程的电镜照片 真核生物具有3种不同的RNA聚合酶: （一）启始阶段 2、mRNA5‘端加帽子和3’加尾巴 帽子结构的意义： 可以使mRNA免遭核酸酶的攻击； 也能与帽结合蛋白质复合体(cap-binding complex of protein)结合，并参与mRNA和核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成。 ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶。 1.何谓转录(transcription),何为转录单元(transcriptional unit)。 2.复制与转录的异同点。 3.转录有什么特点? 4.原核生物 启动子(promoter)的概念和组成特点。TATA box? TTGACA？ 全酶(holoenzyme)和核心酶(core enzyme)的组成特点及功能。 5.真核生物启动子(promoter)的概念和组成特点。TATA box? GC box? Enhancer？ 6. ρ因子的终止子（terminater）和不依赖ρ因子的终止子的结构特点。 7.何谓顺式作用元件(cis-acting elements), 反式作用因子(trans-acting factor),并分别举例说明。 8.真核生物转录后修饰有几种方式?其功能是什么？ 9.什么是基因(gene),什么是断裂基因(spllited gene)?断裂基因是真核生物的真质标记(hall marker)吗? 10.什么是内元(intron),外元(exon) 11.什么是结构基因（structural gene）？ 思考题 顺式和反式剪接 顺式剪接(cis-splicing):发生在同一基因内，切除内含子，相邻的外显子彼此连接。 反式剪接(trans-splicing):不同基因的外显子剪接。 1982年，锥虫：许多mRNA5’端都有共同的35bp前导序列，但该基因上游并无其序列。1986年证实是通过反式剪接形成。来源于基因组中其它位置的重复序列所转录出的小片段RNA。反应机制和核mRNA内含子的剪接相似（通过转酯反应）。 3’端加多聚腺苷酸尾 poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。 一般真核生物在胞浆内出现的mRNA，其poly A长度为100至200个核苷酸之间，也有少数例外。 （二）真核生物tRNA的成熟 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA RNAaseP、内切酶 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 碱基修饰 （3）核苷内的转位反应 （2）还原反应 如：U ? DHU 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 原核前体RNA的加工 转录得到的只是RNA的初级产物，通常要经过加工，才能转变为成熟的RNA。tRNA 和rRNA的转录后加工比较简单。 （三）真核生物rRNA的成熟 转录 45S - rRNA 剪接 18S - rRNA 5.8S和28S-rRNA rDNA 内含子 内含子 28S 5.8S 18S 在哺乳动物细胞的核仁内，三种rRNA的合成过程均先形成45S的共同前体。然后，该前体再断裂成相应的rRNA 。 真核生物RNA修饰 rRNA前体的加工是由多亚基的核蛋白复合物来完成的。真核细胞的5S RNA基因与其它rRNA基因相分开。 转录后经过适当的加工，28S、5.8S与相关的蛋白质一起组成核糖体的大亚基。18S则是小亚基的成分。rRNA的成熟过程中也包括碱基的甲基化修饰和部分核糖的2’-OH甲基化反应。甲基的供体是S-腺苷蛋氨酸。 rRNA的加工过程 rRNA的初级转录物是45S 前rRNA, 经过一系列剪接、修饰，最后成为三种rRNA 原核生物RNA修饰 原核生物RNA转录与翻译过程是偶联的。即mRNA在转录过程中即进行翻译。原核生物mRNA初级转录物没有内含子，故没有剪接过程。核糖体RNA转录时即刻被剪切成23S及16S rRNA。tRNA也进行一些剪接及修饰。 原核 rRNA的加工 rRNA 的加工 （四）RNA的编辑(RNA editing) 人类apo B基因 mRNA