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[工学]第8章 动植物细胞培养
第一节 植物细胞培养反应器 一、植物细胞培养特点 ▓ 比微生物大,大50~100倍; ▓ 培养液黏度与细胞量关系大; ▓ 氧需要量小,CO2对细胞有利。 二、植物细胞反应器 机械搅拌 悬浮培养 非机械搅拌 种类 填充床反应器 固定化细胞培养 流化床反应器 膜反应器 烟草细胞 (一)、悬浮培养反应器 1、机械搅拌式 ▓ 流程 ▓ 反应器结构 与微生物通风罐相似 不同之处:搅拌器为平叶、大平叶、螺旋型。 ▓ 特点:溶质混合均匀、K La高(大于100h-1,一般仅需5~20 h-1),通气量小,但对细胞的剪切力大,功率消耗大,因轴封问题密封性差。 ▓ 反应器结构:鼓泡式、内循环式、外循环式。 ▓ 反应器特点:无搅拌不易染菌,结构简单、传氧效率高,剪切力小,但混合不匀,若过量通气又会导致驱除培养基中CO2和乙烯,对生长不利。 (二)、固定化细胞生物反应器 1、填充床式 ▓ 结构 ▓ 特点:氧传递、 气体排出、T、pH 控制困难。 2、流化床式 ▓ 结构及工作原理 第二节 动物细胞培养反应器 一、动物细胞培养方法 1、贴壁培养:如滚瓶、微载体(60-250微米) 2、悬浮培养;用于非贴壁细胞 3、固定化培养:两者都适用 二、细胞培养方式 1、分批式 2、流加式 3、半连续式 4、连续式 5、灌注式 皮肤细胞 血液细胞 三、大规模 培养反应器 (一)、通气 搅拌式 ▓ 结构 ▓ 工作过程 ▓ 特点:笼式通气 搅拌器可避免通气 时气泡损伤细胞, 微载体不会滞留在 气液界面,流体 混合效果好。但 氧传递系数小,不 能满足高密度培养 要求,气路系统不 能就地灭菌。 动物细胞微珠培养装置 (二)、气升式 ▓ 流程 (三)、中空纤维细胞培养反应器 2、反应器结构:器壁及中空纤维(聚矾或丙烯,几千根,管壁厚50-75微米,直径200微米)。 3、用途:既可培养悬浮细胞又可培养贴壁依赖性细胞。 4、特点:培养器体积小、细胞高密度生长,可浓缩产品、产物纯度高,自动化程度高,生长周期长,但耗材贵。 第三节 微藻培养反应器 一、微藻大规模培养的优点 1、微藻培养过程要有足够的光照; 2、必须供应大量的CO2,同时要把产生的O2排出; 3、其除了要进行气液、液固传递外,还需在轴向充分混合,以保证受光均匀; 4、因大多为海水培养,对设备的腐蚀严重。 二、微藻大规模培养反应器 1、敞开式培养反应器 螺旋藻 小球藻 杜氏藻 管道式光培养反应器 培养过程 反应器结构:透明塑料管弯曲排列成跑道或环绕成圆筒等形式。 特点:CO2利用率高,关照充分,但培养物混合困难,循环系统的剪切力大。 浅层溢流光培养反应器 工作过程 反应器结构:扁平箱,内设一层层交叉分布的隔板,隔板一端有挡板,可形成浅液层,藻细胞可向各个方向湍动。 特点:光照表面积与体积之比大,光利用率高,占地面积小,气液混合均匀。 * * 紫草细胞 2、非机械搅拌式 流程 进口 出口 细胞固定于 表面或内部 特点:混合效果好,但流体切变力和固定化细胞的碰撞使支持物颗粒易破碎,放大困难。 ▓ 特点:没有移动部件、完全密封、便于无菌操作、不易染菌、设计简单、便于放大、氧转换率高。 10L 1、流程 跑道池 池深10~ 30cm,面积最大达几千m2 特点:培养效率低,条件不易控制,易染菌,生产周期短。 浆板轮 螺旋藻商品 控制系统 下游加工部分 培养基 测光探头 泵 过滤器 流量计 空气泵 安全瓶 CO2钢瓶 反应器 空气过滤器 溢流喷射器 贮槽 热交换器 *
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