[农学]8种子扩大培养 09.ppt

* 一般采用微孔接种法接种。 B、实验室种子向种子罐的转移 a 孢子悬浮液 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 首先用无菌水制成孢子悬浮液，塞上已灭菌的带有接种针头的橡皮塞，将针头的另一端迅速插入覆盖在种子罐接种口的橡皮塞上（橡皮塞预先用75%酒精消毒5-10min），将种子罐压力升至0.8kg/cm2左右,待种子瓶中压力平衡后,将种子罐降压至压力为0.3kg/cm2左右，此时孢子悬浮液在压力差作用下注入种子罐。 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 在火焰保护下接入种子罐，也有采用压差法的（少）。 某些种子罐接口设有沟槽，接种前在沟槽内先注入少量酒精，点燃酒精，使在接种口形成一圈火焰，在火焰圈中将菌体液倒入即可。 b 摇瓶菌丝 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 种子罐和发酵罐之间的移种方式，一般都采用差压法。 C、种子罐和发酵罐菌种转移 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 注意： ①移种过程中种子经过的管件预先一定要用1-1.5kg/cm2蒸汽消毒30分钟，消毒结束后管件中通入无菌空气保持正压条件下冷却。 ②移种过程中要防止种子罐和种子接受罐表压降为零，以免染菌，一般情况下通入较大的无菌空气。 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 种子罐级数是指制备种子需逐级扩大培养的次数。一般根据种子的生长特性，孢子发芽及菌体的繁殖速度，以及发酵罐的容积而定。 Ⅱ 种子罐级数 A、定义 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 例如： 谷氨酸生产，种子接入种子罐后于32℃培养7-10h，菌体浓度迅速升至108～109个/ml，即可接入发酵罐作为种子。 B、对于生长快的菌种，种子用量少，故种子罐数量和级数相应也少。 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 例如：青霉素生产菌株的扩大培养P113/P145 27℃ 27℃ 孢子悬浮液→一级种子罐 → 二级种子罐 → 粗壮菌体→发酵罐 40h 10-24h 发芽罐 繁殖罐 三级发酵 二级种子扩大培养 C、对于生长慢的菌种，种子罐数量和级数相应要多。 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 注意： 有时将实验室制备种子过程的固体培养基培养或摇瓶液体培养称一级种子扩大培养。 种子罐数越少，越有利于简化工艺，防止杂菌污染。 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 是指种子罐中培养的菌体从开始接入到移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。 Ⅲ 接种龄与接种量 A、接种龄 生物制品工艺学与原理—上篇 第八章 种子扩大培养 * 接种龄是发酵过程中必须控制的一个重要因素之一。通常接种龄以