[]分析化学色谱分析法概论15.pptVIP

例 在Apiezol L柱上，柱温100℃，用正庚烷及正辛烷为参考物质对，测得t0=30.0s，正庚烷的tR=204.0s，乙酸正丁酯的tR=340.0s及正辛烷的tR=403.4s。 理论塔板高度和理论塔板数 H=σ2/L n=L/H n=16(tR/W)2 n=(tR/ σ)2 n=5.54(tR/W1/2)2 理论塔板高度(H)和理论塔板数(n)都是柱效指标。 σ或W1/2↓，H ↓，柱效↑ 用t’R代替tR计算塔板数，称为有效理论塔板数(nef)；求得的塔板高度为有效理论塔板高度（Hef） 从上两式可以看出： 1：色谱峰W越小，n就越大，而H就越小，柱效能越高。因此，n和H是描述柱效能的指标。 2：在同一色谱柱上，不同组分得到不同的理论塔板数，同一组分在不同色谱条件下理论塔板数也不相等。 n=16(tR/w)2 n=L/H 2. 速率理论 1956年荷兰学者范第姆特（Van Deemter）等在研究气液色谱时，提出了色谱过程动力学理论——速率理论。他们吸收了塔板理论中板高的概念，并充分考虑了组分在两相间的扩散和传质过程，从而在动力学基础上较好地解释了影响板高的各种因素。该理论模型对气相、液相色谱都适用。范第姆特（Van Deemter）方程的数学简化式为 式中u为流动相的线速度；A，B，C为常数，分别代表涡流扩散项系数、纵向扩散项系数、传质阻抗项系数。 现分别叙述各项系数的物理意义。 （1）涡流扩散项的概念 在填充色谱柱中，当组分随流动相向柱出口迁移时，流动相由于受到固定相颗粒障碍，不断改变流动方向，使组分分子在前进中形成紊乱的类似“涡流”的流动，故称涡流扩散。 （动画） 涡流扩散项的影响因素 1:涡流扩散项与填充物的平均直径的大小和填充不规则因子有关，与流动相的性质、线速度和组分性质无关。 2:为了减少涡流扩散，提高柱效，使用细而均匀的颗粒，并且填充均匀是十分必要的。对于空心毛细管，不存在涡流扩散。因此A＝0。 A = 2λdp dp：固定相的平均颗粒直径 λ：固定相的填充不均匀因子 （2）纵向扩散项的概念 纵向扩散是由浓度梯度造成的。组分从柱入口加入，其浓度分布的构型呈“塞子”状。 如右图所示。它随着流动相向前推进，由于存在浓度梯度，“塞子”必然自发地向前和向后扩散，造成谱带展宽。 （动画） B = 2 γ Dg γ ：扩散阻碍因子。填充柱色谱， γ 1。 Dg：试样组分分子在气相中的扩散系数（cm2·s-1） (1) 存在着浓度差，产生纵向扩散; (2) 扩散导致色谱峰变宽，H↑(n↓)，分离变差; (3) 分子扩散项与流速有关，流速↓，滞留时间↑，扩散↑; (4) 扩散系数：Dg ∝(M载气)-1/2 ； M载气↑，B值↓。 纵向扩散项的影响因素 传质过程的概念 在气—液填充柱中，将高沸点液体(固定液)涂在多孔性载体上构成固定相。 样品混合物被载气带入色谱柱后，组分在气—液界面进入固定液，并扩散至固定液深部，进而达到动态分配“平衡”。 当纯净载气或含有低于“平衡”浓度的载气到来时，固定液中该组分的分子将逐次回到气—液界面，逸出，而被载气带走(转移)。这种溶解、扩散、转移的过程称为传质过程。 影响此过程进行的阻力称为传质阻抗，用传质阻抗系数描述。 （3）传质阻抗项 （动画） 传质阻抗对峰宽的影响 由于液相传质阻抗的存在，增加了组分在固定液中停留的时间，而晚回到载气中去。因此这些组分的分子落后于在两相界面迅速平衡并随同载气流动的分子，使峰展宽，如图所示。 减少传质阻抗的办法 降低固定液液膜厚度(df)是减小传质阻抗系数的主要方法。在能完全覆盖载体表面的前提下，适当减少固定液的用量。但固定液也不能太少，否则柱寿命短。且df还影响k值，df小，k小。 * 第17章 色谱分析法概论 17.1.1.色谱法的起源和发展 混合物最有效的分离、分析方法。 俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置：色谱原型装置，如图。 色谱法是一种分离技术 色谱法（层析法）不仅用于有色物质分离，且大量用于无色物质分离。 管内填充物，称为固定相。 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 17.1 概述 30年代 出现薄层色谱法 40年代 纸色谱法 (塔板理论) 50年代 气相色谱法兴起，奠定了现代色谱法的基础，可“在线”分析。 （速率理论） 60年代气相色谱-质谱联用技术 70年代高效液相色谱法(HPLC)的崛起,把色谱法又推进到一个新里程碑。 80年代 液相色谱联用技术、超临界流体色谱 90年代 毛细管电泳法 发展历程 (1)．按两相分子的聚集状态分： 流动相 固定相 类型 液相色谱 液体