受体的放射分析-核医学与核药学教学、学习课件演示幻灯片.pptVIP

第七章 受体的放射分析 ; §1. 概 论;一、受体功能;二、受体的分类:1、膜受体 跨膜 2、核受体 细胞内;受体的亚型：指受体分子结构上既有部分相同之处，也存在部分差别，它们对一定的配基有不同的亲和力，在生物学上具有各自不同的效应。受体亚型的区分是生物进化的结果，有利于机体处理信息的能力及适应性更强。 受体数量：占细胞蛋白总量十万之一到百万分之一（一个细胞上仅有数千个受体分子），一般方法难以分离和测定受体分子。 ;配体：是指能和受体结合并引起相关效应的化合物。除了与受体结合外本身并无其他功能，它不能参加代谢产生有用产物，也不直接诱导任何细胞活性，更无酶的特点，它唯一的功能就是通知细胞在环境中存在一种特殊信号或刺激因素。; 配体与受体的结合是一种分子识别过程，它靠氢键、离子键与范德华力的作用，随着两种分子空间结构互补程度增加，相互作用基团之间距离就会缩短，作用力就会大大增加，因此分子空间结构的互补性是特异结合的主要因素。 同一配体可能有两种或两种以上的不同受体，例如乙酰胆碱有烟碱型和毒蕈型两种受体，同一配体与不同类型受体结合会产生不同的细胞反应。如 Ach可以使骨骼肌兴奋，但对心肌则是抑制的。配基可以是神经递质、激素、某些药物等。;三、跨膜受体的信号传递通路 跨膜受体是含糖或不含糖的蛋白质分子，它的主要作用是将细胞外的信号传导到细胞内，信号再从细胞浆传递到效应器，最后是一个特定的生物学效应。信号的这种传导过程称为信号传导通路（signal transudation pathway），它是当今生物学领域中一个重大的研究课题。;四、受体与配基结合的特性 ;3、特异性和亲和性 受体具有特异识别配基的性能，因此只有严格构型和构象的配基分子才能选择性地与受体结合。受体的特异性还表现在器官或组织（靶器官）的专一性上，如雌激素对子宫、阴道、乳腺等器官有兴奋作用，这是因为这些器官上雌激素受体的数量明显高于非靶器官。受体的亲和性是指受体和配基的结合能力，受体亲和性高就说明受体和配基结合的牢固，不容易解离。;六、受体与疾病;§2.受体配基结合反应的基本原理 ;一、受体与配基相互结合的基本规律 （一）质量作用定律（mass action law） 简单单位点系统：指对某种受体而言，它的全部受体都以相同的亲和性以单分子与特定的配基相结合，而且不表现明显的正负协同作用，理论上讲结合后产生的生物效应也应完全相同。这种系统称之为。。 有时，一个受体系统中存在两（多）种亚型，但所用配基无选择性，尽管亚型的生物效应可能不全相同，结合反应却表现出完全相同的特征，这时，也可作为单位点系统来看待。;（二）复合物的浓度和配基浓度的关系： ;曲线的高度主要反映受体的数量多少，曲线上升的快慢则主要反映受体和配基的亲和力。 ;（三）非特异结合（non-specific binding，NSB） 上述饱和曲线是受体与配基的特异结合形成的。这种结合的特点是低容量和高亲和力，所以容易饱和。但是，任何受体标本除特异结合外，还会有一部分非特异结合，当分离特异结合的复合物测量放射性时，这部分非特异结合的放射性混在一起，测到的是总放射性（total binding，TB），必需先减去非特异结合（NSB），才能得到特异结合（specific binding，SB）的放射性。 ; NSB主要来自杂蛋白，反应器壁，分离材料的吸附，它的特点是，容量很大，而亲和力低，因此在一般情况下不被饱和，也就是随着配基浓度的升高，它不呈饱和曲线，而是一条上升的直线（图9－l）。另外，如果系统中存在大量同种受体的非标记配基，则放射性的SB被非标记配基取代，而NSB由于容量很大，空余的位点很多，放射性不被取代。所以要从TB中减去NSB，最基本的办法是做一系列平行管，所有的条件都与 TB管相同，只是多加 100－1000倍量的非标记配基，将SB完全取代掉，这时的放射性结合即为NSB。由于NSB和放射配基呈直线关系，多点饱和法的实验中往往只需做3－4点，再用直线回归法求出其余各点的放射性。 ;（四）正负协同作用 ;（五）受体与配基反应的动力学（kinetics） ;（六）竞争性取代反应 在一个受体和放射配基的反应系统中加入另一个化合物，它若能和受体的结合位点结合，则会与放射配基竞争与受体结合，最终将表现为放射配基与受体形成复合物的能力降低，但受体数量不变,所以叫竞争性取代反应。此时，非标记的起竞争作用的配基称为竞争剂,它们和受体结合后不改变受体分子的结构。; 表示竞争剂抑制作用强弱的指标有二个：IC50值和KI。IC50值是指抑