血液肿瘤DNA疫苗研究进展演示文稿.pptVIP

* * 血液肿瘤DNA疫苗研究进展 暨南大学医学院血液病研究所 李扬秋 肿瘤免疫治疗意义 协助清除残留病变 形成免疫记忆, 预防肿瘤复发 肿瘤免疫治疗方式 主动免疫——疫苗 过继性免疫——外源性细胞 Eur Urol 53(4)694 肿瘤免疫治疗各种途径 现代肿瘤免疫治疗关键点 抗原特异性 可持续性 肿瘤疫苗类型 蛋白疫苗 多肽疫苗 核酸疫苗 细胞疫苗 不同疫苗作用的共同途径 J Biomed Sci, 2008, 15(3)275 DNA疫苗构建 DNA疫苗免疫途径和作用机制 Nat Rev Cancer, 2008, 8(2)108 DC的抗原处理过程 Exp Mol Med, 2007, 39(6)679 独特型IgH Yonsei Med J, 2007, 48(1)1 独特型IgH/IgLDNA疫苗的构建 BBRC, 2008, 370(2)279 PML-RARα DNA疫苗的构成 Haematologica, 2005, 90(8)1042 WT1 DNA疫苗的构建 Blood, 2008, May 23 血液肿瘤DNA疫苗免疫效应 体外免疫效应 体内免疫效应 普通小鼠, 肿瘤负载小鼠 微小残留病小鼠, NOC/SCID小鼠 特异性体液免疫和细胞免疫 临床试验 DNA疫苗诱导 HHD 小鼠的 WT1特异IFN-γ 分泌T细胞 Blood, 2008, May 23 疫苗注射局部肌肉组织细胞反应 Vaccine, 2008, 26(35)4420 β-actin PML-RARα IL2 PML-RARa IL-2 Positive + + P组 - - PR-P组 + - PR-IL2-P组 + + IL2-P组 - + Negtive - - RT-PCR 检测注射部位肌肉中基因表达 血清中PML-RARα蛋白抗体的检测 DNA疫苗细胞免疫效应 Vaccine, 2007, 25 Suppl 2B24 BCR-ABL DNA疫苗免疫Ph+ALL小鼠存活率分析 Vaccine, 2008, 26(36)4669 独特型IgH疫苗免疫B细胞淋巴瘤小鼠存活率分析 BBRC, 2008, 370(2)279 独特型蛋白疫苗临床前和临床试验历史 临床前研究 1972年: Id蛋白疫苗 1987年: Id-KLH疫苗 1996年: Id-KLH+GM-CSF 临床研究 1992年: 第一个临床试验: Id-KLH用于滤泡性淋巴瘤 1997年: I期 Id-KLH 长期效应观察 (41例) 1999年: II期 Id-KLH+GM-CSF (20例) 2004年: I期 脂质体Id+IL-2 (10例) 2006年: I期 Id-KLH+GM-CSF (单独治疗32例复发惰性NHL) 2005年: III期 Id-KLH+GM-CSF (经CHOP-R等化疗达到CR的滤泡性淋巴瘤) 血液肿瘤DNA疫苗临床前和临床试验 临床前实验 2005年: PML-RARα-FrC 2008年: PML-RARα-GM-CSF/IL-2 2008年: BCR-ABL-GM-CSF, WT1 临床试验 2002年: I期 Id:化疗CR期滤泡性淋巴瘤 2007年: I期 Id scFV-FrC:化疗CR期滤泡性淋巴瘤 2007年: III期 p53 DNA疫苗免疫佐剂 细胞因子 DC TLR CpG 双基因DNA疫苗 抗原特异基因联合增强免疫效应的基因 GM-CSF, IL-2, IL-7,IL-1,IL-12,IL-18 毒素基因片段 KLH (Keyhole-limpet haemocyanin) HSP70 Flt3-L Nat Rev Cancer, 2008, 8(2)108 双基因疫苗构成方式 * * * * * 取另一侧注射部位的肌肉组织 加入适量TRIZOL后研磨，提取RNA ， 反转录合成的CDNA做为模板检查 β-actin基因 结果表明合成的cDNA的完整 检测PML-RARα基因 IL2基因 的转录情况 均可看到有特异的扩增条带出现 另一方面用流式细胞仪计数各组 FITC荧光阳性的NB4细胞百分率。 可见PR-IL2-P组明显要高于其他组