[生物学]胚胎移植.pptVIP

2.2 供体的超数排卵处理 意义：让每个供体提供更多的胚胎 处理时间： 牛day 9-13; 绵羊：day12-13; 山羊：day17 影响超排效果的因素 1、个体差异：品种、年龄、胎次、重复超排 2、环境条件：季节、营养、畜舍环境卫生 3、超排方法：激素类别、厂家批次、 牛超数排卵示意图（FSH法） 总剂量：8-10mg；325-400IU PMSG法 孕马血清促性腺激素(PMSG)处理法 在情期的11～12d，一次肌注PMSG2500～3000IU，48h后宫注PGF2α2.4mg发情后约18h肌注等量的抗PMSG。 放栓 发情鉴定 配种 0123456789 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 12:00 PMSG 2500IU 12:00 宫注氯前列烯醇4ml 12:00 检栓 抗血清 配种 配种 检查黄体 冲胚 2.3 发情观察和配种 多数个体在结束处理后12～48h发情 发情鉴定：每日2-3次，观察+试情； 发情开始后8-12小时首次输精；间隔12小时再输精1次； 每次输精有效精子数：2400万； 2.4 胚胎的采集 采集时间的确定：发育时程 采集方法： 手术法采集：适应范围广 非手术法采集：牛、马 2.5 胚胎的检查和鉴定 胚胎检查方法 含胚胎的冲胚液的处理； 胚胎的查找与收集； 胚胎的分级 A级：发育阶段与胚龄一致；胚胎形态完整，轮廓清晰，呈球形，分裂球 大小均匀，结构紧凑，色调和透明度适中，无游离的细胞和液泡 B级：发育阶段与胚龄基本一致；胚胎形态完整，轮廓清晰，分裂球大小基本一致，可见到少量游离的细胞和液泡 C级：轮廓不清晰，色调发暗，结构较松散，游离的细胞或液泡较多 D级：胚胎细胞无组织结构，碎片占主要成分； 二细胞至四细胞胚胎 胚胎的早期发育过程 2.6 供体牛、受体牛的同期发情 对群体母畜采取措施，使之发情相对集中在一定时间范围的技术，也称发情同期化。 1、自然同期发情 根据受体牛的发情观察，与供体牛发情前后相差一天内的牛，可作为受体。 2、人工处理的同期发情 原理：人为延长黄体期； 方法：孕激素法；前列腺素法； 同期发情超排同时处理举例 放栓 发情鉴定 0123456789 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 7:00 FSH 4ml 18:00 FSH 4 ml 7:00 FSH 2.5ml 18:00 FSH 2.5ml 7:00 FSH 2ml 14:00 PG6ml 18:00 FSH 2ml 7:00 FSH 1.5ml 14:00 检栓 18:00 FSH 1.5ml 检查黄体 移胚 1、手术法移植 移植入输卵管 移植入子宫角 2、非手术法移植 2.7 胚胎移植入受体 手术法移植 手术法是指将动物保定、全身麻醉或局部麻醉后，清理手术部位，在背部或腹中线开口，将输卵管或子宫拉出体外，移植胚胎。 如果进行输卵管移植，把吸好胚胎的移植管由输卵管伞口插入管内，尽量插得深一些，然后把胚胎吹入输卵管内。移植时，应尽量少带入液体。 如果进行子宫移植，在离子宫角与输卵管接合部约5cm处，先用钝头针扎一小孔，随即抽出，把移植管顺此孔插入子宫腔，吹入胚胎。复位输卵管或子宫、缝合。 手术法一般是移植卵裂早期的胚胎。  胚胎装管示意图 非手术法移植 健康观察 妊娠检查 供体的发情观察与利用 2.8 供、受体的术后护理与观察 2.9 影响胚胎移植妊娠率的因素 胚胎因素 母体因素 其他因素 第二章 胚胎移植技术 1、胚胎移植概述 定义：Embryo Transfer（ET）是将体内、外生产的哺乳动物早期胚胎移植到同种的生理状态相同的雌性动物生殖道内，使之继续发育成正常个体的生物技术，即通常所说的“借腹怀胎”。 Donor Recipient Multiple ovulation and embryo transfer， MOET 1.1 胚胎移植的历史 作者 时间 事件 Heape 1890 首次家兔胚胎移植成功 Nicholas 1933 大鼠胚胎移植成功 Warwick，Berry 1949 绵羊、山羊胚胎移植成功 Kvansnickii 1951 猪胚胎移植成功 Willett等 1951 牛胚胎移植成功 Marden，Chang 1952 首次家兔胚胎洲际运输（10℃） Alberta家畜移植有限公司 1971 首次成立家畜胚胎移植商业公司牛 Whittingham 1972 经长期冷冻，牛胚胎发育产仔 1975