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[高二理化生]酵母细胞的固定化讲课
429572439gao 4、某一实验小组的同学,欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验,实验材料及用具齐全。 (1)酵母细胞的固定采用的方法是________。 (2)请完善该实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程的步骤: ①配制氯化钙溶液时应用蒸馏水。 ②海藻酸钠溶液应用______________加热。 ③海藻酸钠溶液必须____________________才能加入酵母细胞。 ④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入________ 中形成____________。 (3)该实验小组用如图所示的装置来进行葡萄糖发酵。 ①为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复运用,实验过程中,一定要在________条件下进行。 ②加入反应液后的操作是关闭______________________________________。 ③装置的长导管起到什么作用?_____________________________。 ④实验过程中,可能会出现的现象:_______________________ 【解析】 由于细胞过大,难以被吸附或结合,因此多采用包埋法进行固定化。操作过程中,必须等海藻酸钠溶液冷却后才能将其与酵母细胞混合,否则酵母细胞会在高温下死亡。酵母菌利用葡萄糖的发酵过程中会产生CO2,为减小装置中的压力,应及时将其排出。 【答案】 (1)包埋法 (2)小火或间断 冷却至室温 氯化钠溶液 凝胶珠 (3)①无菌 ②活塞1和活塞2 ③释放CO2 ,减小反应柱内压力并可防止其他微生物污染 无菌 活塞1和活塞2 释放CO2 ,减小反应柱内压力并可防止其他微生物污染 有气泡产生、有酒味散发 * * 课题3 酵母细胞的固定化 课题背景 酶制剂的优点: 催化效率高、低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。 酶制剂存在的缺陷: 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活; 2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本; 3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。 如果你是工程技术人员,你如何解决这个问题? 固定化酶技术 即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体上)。 基础知识 (一) 固定化酶的应用实例 ——生产高果糖浆 1、高果糖浆的生产原理: 葡萄糖异构酶 果糖 葡萄糖 高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人的健康更有益。 葡萄糖异构酶的优点: 稳定性好、可以持续发挥作用 .2、固定化酶的反应柱示意图 使用固定化酶技术,将葡萄糖异构酶固定在一种颗粒状的载体上,再将这种酶颗粒装在一个反应柱内,柱子底端装有分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔,而反应溶液却可以自由出入。 3、高果糖浆的生产操作: 从反应柱上端注入葡萄糖溶液,从下端流出果糖溶液,一个反应柱可连续使用半年。 4、固定化酶技术的优点: 酶既能与反应物接触,又容易与产物分离,提高产品质量;同时固定在载体上的酶还可以反复利用,节约成本。 1、概念:固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 (二)固定化细胞技术 2、常用方法:包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。 3、酶和细胞固定方法的选择 酶适合采用化学结合和物理吸附法固定 细胞适合采用包埋法固定,即将微生物细胞均匀的包埋在不溶于水的多孔性载体上 固定化细胞常用的载体 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等 酶的几种固定方式 将酶包埋在细微网格里 将酶相互连接起来 将酶吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 物理吸附法 课堂讨论: 1.从操作角度来考虑,你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易?哪一种方法对酶活性的影响更小? 2.固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶? 3.如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法? 4.如果反应物是大分子物质,又应该选择哪种方法? 固定化细胞技术 固定化细胞固定的是一系列酶 固定化细胞技术 固定化酶技术 〖思考〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应,应当固定(酶、细胞);若将蛋白质变成氨基酸,应当固定(酶、细胞)。 〖思考〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应,应当固定(酶、细胞);若将蛋白质变成氨基酸,应当固定(酶、细胞)。 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降 成本低、操作容易、对酶活性的影响更小、可以催化一系列的反应、容易回收 固定化细胞 一种酶只能催化一种化学反应, 不能催化一系列的酶促反应 酶
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