[化学]吸光光度法.ppt

第六章 可见分光光度法思考题 1．朗伯-比耳定律的物理意义是什么？写出其数学表达式。 2．摩尔吸光系数ε的物理意义是什么？其大小与哪些因素有关？ε在分析化学中有何意义？ 3．什么是吸收曲线？什么是标准曲线？它们有何实际意义？ 4．显色反应如何选择？ 5．吸光度测量条件如何选择？ 6．光度分析法中，参比溶液应如何选择？ 7．示差光度法的测定原理是什么？如何用示差光度法进行定量分析？ 答案 1.答：当一束平行的单色光通过液层厚度为b的有色溶液时，溶液的吸光度A与液层的厚度b和溶液的浓度c成正比。即A= lg(I0 / I) = εbc 2.答：摩尔吸光系数ε在数值上等于1mol·L-1吸光物质在1cm光程中的吸光度。它是吸光物质在特定波长下的一个特征常数。其单位为L· mol-1 ·cm-1。由于ε值与入射光波长有关，故表示ε时，应注明所用入射光波长。 在分析化学中，ε值的大小反应了：（1）吸光物质对某一特定波长光吸光能力大小的量度。ε值越大，该吸光物质的吸光能力越强。（2）衡量光度分析方法灵敏度的重要指标，ε值越大，方法的灵敏度越高。 3.答：以入射光波长作横坐标，用分光光度计测量每一波长下物质对光的吸光度作纵坐标所绘制的曲线，称为吸收曲线。其作用是：选择入射光波长，在此波长下测量吸光度，则分析的灵敏度最高。因此，吸收曲线是吸光光度法中选择测定波长的重要依据。 在某特定波长下，用分光光度计测量一系列不同浓度的标准溶液的吸光度，然后以浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标所绘制的曲线，称为标准曲线（亦称工作曲线）。它是作为待测物质定量分析的依据。如果在相同条件下测得待测试液的吸光度值，从标准曲线上就可查得待测试液的浓度，这就是标准曲线法。 4.答：显色反应的选择原则是： （1）选择生成的有色物质（MR）的ε较大的显色反应； （2）显色剂（R）在测定波长处无吸收 ，即ε尽可能小； （3）反应生成的有色物质（MR）的组成要恒定，化学性质稳定。 5.答：吸光度测量条件包括三个主要方面： （1）入射光波长的选择： 入射光的波长应根据吸收曲线选择λmax为宜。因在此波长处ε值最大，使测定具有较高的灵敏度。 （2）参比溶液的选择： 在吸光度的测量中，由于比色皿的反射以及溶剂、试剂等对光的吸收，使得测得的吸光度值不能真实地反映待测物质对光的吸收 ，也就不能真实地反映待测物质的浓度。为了校正上述影响需要正确选择参比溶液。通过调节仪器使参比溶液的吸光度为零（A= 0）,或透光度T= 100% 。借此消除上述影响。 （3）吸光度读数范围的选择 吸光度值太大或太小时，读数波动所引起的吸光度读数误差较大，为了减小读数误差，应使测量的吸光度值控制在A= 0.2～0.8（或透光度T在15%～65%）范围之内。 可以采用以下措施： （a）控制溶液的浓度，如改变试样的称量，或改变溶液的稀释度等； （b）选择不同厚度的比色皿，以改变光程的长度。 6.答：参比溶液的选择原则如下： （1）若仅待测物（M）与显色剂（R）的反应产物（MR）有吸收，可用蒸馏水作参比溶液。 （2）若待测物（M）无吸收 ，而显色剂（R）或其它试剂（R′）有吸收 ，则用不加试样的空白溶液作参比溶液。 （3）若试样中的其它组分有吸收（待测物M之外的组分，如N），但不与显色剂反应，当显色剂无吸收时，可用试样溶液作参比溶液；当显色剂有吸收时，可在试液中加入适当掩蔽剂将待测组分掩蔽后再加显色剂，以此溶液作参比溶液。 总之，选择参比溶液的原则是：应使测得的试液的吸光度能真正反映待测物的浓度。 7.答：示差光度法是用一个比被测试液浓度 （cx）稍低的标准溶液（cs）作参比溶液与试液进行比较。以cs作参比溶液，调节仪器透光度读数为100%（A= 0），测得的吸光度是试液与参比溶液的吸光度差值（称为相对吸光度），即ΔA=εb(cx- cs)= εbΔc 。由此可知，被测试液与参比溶液的吸光度差值（ΔA）与两溶液浓度之差(Δc)成正比，这就是示差光度法的基本原理。 示差光度法常采用标准曲线法进行定量分析。以上述浓度为cs的标准溶液作参比溶液，测定一系列Δc已知的标准溶液的相对吸光度ΔA，绘制ΔA~Δc工作曲线，再测未知液的相对吸光度ΔA，由工作曲线查出相应的Δc，经换算cx= cs+Δc，即为所求。 2.溶液的pH值 在相同实验条件下，分别测定不同pH值条件下显色溶液的吸光度。选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的pH范围。 酸度范围为pH2~10 pH A §5 分 光 光 度 法 的 建 立 3.显色时间