第七节 温度对发酵的影响.pptVIP

第七节 温度对发酵的影响及控制 一、温度对发酵的影响 1、温度对生长的影响 不同微生物的生长对温度的要求不同，根据它们对温度的要求大致可分为四类：嗜冷菌适应于0～26℃生长，嗜温菌适应于15～43℃生长，嗜热菌适应于37～65℃生长，嗜高温菌适应于65℃以上生长。 每种微生物对温度的要求可用最适温度、最高温度、最低温度来表征。 在最适温度下，微生物生长迅速； 超过最高温度微生物即受到抑制或死亡； 在最低温度范围内微生物尚能生长，但生长速度非常缓慢，世代时间无限延长。 在最低和最高温度之间，微生物的生长速率随温度升高而增加，超过最适温度后，随温度升高，生长速率下降，最后停止生长，引起死亡。 微生物受高温的伤害比低温的伤害大，即超过最高温度，微生物很快死亡；低于最低温度，微生物代谢受到很大抑制，并不马上死亡。 2、温度对产物合成的影响 各种微生物的产物合成有一定的最适温度； 影响发酵过程中各种反应速率，从而影响微生物的生长代谢与产物生成。 e.g. 四环素发酵中金色链霉菌：T30℃，产生金霉素；T达35 ℃，产生四环素； 谷氨酸发酵中扩展短杆菌： 30℃培养后37 ℃发酵，积累过量乳酸。 改变发酵液的物理性质，间接影响菌的生物合成。 影响酶系组成及酶的特性。 米曲霉制曲：温度控制在低限，有利于蛋白酶合成。 凝结芽孢杆菌的α-淀粉酶热稳定性：55℃培养→90℃保持60min，剩留活性为88%~99%；35℃培养→经相同条件处理，剩余活性仅有6%~10%。 二、发酵过程引起温度变化的因素 Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q辐射 发酵热是引起发酵过程温度变化的原因。 所谓发酵热就是发酵过程中释放出来的净热量。什么叫净热量呢？在发酵过程中产生菌分解基质产生热量，机械搅拌产生热量，而罐壁散热、水分蒸发、空气排气带走热量。这各种产生的热量和各种散失的热量的代数和就叫做净热量。发酵热引起发酵液的温度上升。发酵热大，温度上升快，发酵热小，温度上升慢。 4、辐射热Q辐射 发酵罐内温度与环境温度不同，发酵液中有部分热通过罐体向外辐射。辐射热的大小取决于罐温与环境的温差。冬天大一些，夏天小一些，一般不超过发酵热的5％。 三、发酵温度的选择 定义：最适温度是指在该温度下最适于菌的生长或产物的生成，它是一种相对概念，是在一定条件下测得的结果。 二阶段发酵 e.g.青霉素发酵：菌体生长期,30 ℃ 青霉素合成分泌期, 20 ℃ 如四环素生长阶段28℃，合成期26℃后期再升温； 黑曲霉生长37℃，产糖化酶32～34 ℃ 。 但也有的菌种产物形成比生长温度高。如谷氨酸产生菌生长30～32 ℃ ，产酸34～37℃ 。 最适温度选择要根据菌种与发酵阶段做试验。 思考题 1、根据微生物对温度的依赖可分类成哪几类微生物？ 2、微生物对温度要求不同的原理是什么？ 3、发酵过程的温度会不会变化？为什么 4、发酵热的定义 5、生物热的大小与哪些因素有关？ 6、温度对发酵有哪些影响？ 7、发酵过程温度的选择有什么依据？ A比B好 例2 重组大肠杆菌人Cu/Zn-SOD的高表达 Lac启动子，用乳糖作诱导剂 270C 300C 340C 370C SOD 4966 14270 6590 4638 比活 810 1471 679 526 蛋白 6.129 9.70 9.79 11.88 OD600 7.41 10.72 11.78 24.77 原因： 1、乳糖被用于合成菌体和其它蛋白，减少了合成SOD的原料，随着温度升高，蛋白和菌浓都增加。 2、高温下可能SOD降解速率增加，杂蛋白增加 3、低温下由于比生长速率低，质粒脱落减少 4、低温下菌的衰老减缓，死亡率低 * * 1、生物热Q生物 在发酵过程中，菌体不断利用培养基中的营养物质，将其分解氧化而产生的能量，其中一部分用于合成高能化合物（如ATP）提供细胞合成和代谢产物合成需要的能量，其余一部分以热的形式散发出来，这散发出来的热就叫生物热。 生物热与发酵类型有关 微生物进行有氧呼吸产生的热比厌氧发酵产生的热多。 一摩尔葡萄糖彻底氧化成CO2和水 好氧：产生287.2千焦耳热量， 183千焦耳转变为高能化合物 104.2千焦以热的形式释放 厌氧：产生22.6千焦耳热量