自主试验方案酸性环境对小麦第一片真叶的影响.PDFVIP

自主实验方案：酸性环境对小麦第一片真叶的影响 组员：孟幸异10111910201 辛月10111910207 【实验目的】 模拟自然环境中酸性土壤与水质，探究酸性水质胶管对于小麦第一片真叶的光合速率、 叶绿素含量、可溶性糖含量以及含水量的影响。 【实验原理】 酸性环境会降低小麦种子的出芽率，因此在最适环境（PH 为6.5 ）中培养使种子出芽后， 接种到配置的酸性（PH 为5 ）的MS 培养基中，在浇灌水中加入盐酸，将PH 调到5，浇灌 小麦以模拟自然环境中酸性环境。(参考文献) 用光合测定仪来测定小麦第一片真叶的光合速率。 用便携式叶绿素测定仪来测定叶绿素的含量。 称重后将叶片烘干，烘干前后质量之差计算出叶片含水量。 把烘干的叶片用蒽酮比色法来测定可溶性糖的含量。 【材料与器材】 材料与试剂：小麦种子120 个、盐酸、水、MS 培养基、蛭石、纱布、浓硫酸 80 ％乙醇、葡萄糖标准溶液（ 100 μg/mL ）、蒽酮试剂：称取 1.0 g 蒽酮，溶于 80% 浓 硫酸（将 98% 浓硫酸稀释，把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中） 1000 mL 中，冷却至室温， 贮于具塞棕色瓶内，冰箱保存，可使用 2 ～ 3 周、75%酒精。 器材：花盆45 个 （两组共享）、便携式叶绿素测定仪、光合测定仪、烘箱、电子天平、恒温 批注 [y1]: 每盆多种一些，少用一些 水浴、分光光度计、离心机、刻度离心管、漏斗、大烧杯、滤纸、100 毫升量筒、移液管、 花盆，你们在培养过程中不断取材， 容量瓶、PH 试纸、滴管、培养皿5 个、带塞大试管8 个、1L 的容量瓶1 个、酒精灯、比色 应该没有问题，太多的花盆没有地方 皿一套、1L 细口瓶、研钵、保鲜膜。 放置！！如果实在需要这么多，可能 你们需要培养在生物站点玻璃房中。 【实验步骤】 小麦的种植： 选种 将经过太阳暴晒的小麦种子用蒸馏水浮选，去掉干瘪的籽粒，留下的种子在75%的酒 精中浸泡30-60 秒，用蒸馏水反复洗涤。然后将消毒处理后得到的小麦种子浸泡于温水中2 小时，从中挑选颗粒饱满的种子进行萌发。 培养装置制备 1. 往花盆中加入蛭石，从底盘中加入适量水，保证蛭石保持湿润，不黏手的情况，然 后用保鲜膜覆盖。 萌发 1. 按照培养皿大小把纱布裁剪三层，铺至萌发容器底部，用蒸馏水润湿。 2. 将选好的种子均匀撒在纱布上，每皿保持30 种，用保鲜膜将萌发容器封盖。 3. 每天更换保鲜膜（通气），向其中加水使其保持湿润状态（备注：以用手指摁下有 参考文献：李清芳等.PH 值对小麦种子萌发和幼苗生长代谢的影响[J].安徽农业科学,2003,31(2):185-187. 水渗出为标准），置于光照培养架上，25 ℃；三天后将已经发芽、生根的小麦种子转移至培 养装置中。 种子转移 1. 将22 号萌发的种子，转移至培养装置中，每盆点播8 颗*45 盆（酸、碱、对照各 15 盆），从底盘中加入适量水（实验组氢氧化钠调节PH 至8、对照组调PH=6.5 ），保证蛭 石保持湿润，不黏手的情况，然后用保鲜膜覆盖。 2. 每隔两天向培养装置中浇水（PH8、6.5 ），标准以淹没塑料筐、或泡沫板完全浮起 为最佳。 MS 培养基配置 按照母液比例，配制1/2MS 盐培养基1L，储存于冰箱中。 标准曲线制作 取 6 支大试管，从 0 ～ 5 分别编号，按表加入各试剂。将各管快速摇动混匀后， 在沸水浴中煮 10 min ，取出冷却，在 620 nm 波长下，用空白调零测定光密度， 以光密度为纵坐标，含葡萄糖量（ μg ）为横坐标绘制标准曲线。 管 号 试 剂 0 1 2 3 4 5 100 μg/mL 葡萄糖溶液（ mL ） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0