组蛋白测定方法.pdfVIP

新探讨 不同测定方法对饲料粗蛋白 测定结果影响的研究 扬州大学动物科学与技术学院/王潍波 摘 要 试验采用国标法、凯氏定氮仪法、强碱直接蒸馏法、双氧水测定法对鱼粉、玉米蛋白、豆粕三种饲料 原料的粗蛋白含量进行分析测定，旨在探讨 4 种方法的测定误差，以期找到最好的测定方法。试验结果表明，4 种 方法的测定结果差异不显著（P0.05）,均可用于粗蛋白的测定；其中强碱直接蒸馏法测定是最好的，可以节省试剂， 减少实验经费，在一般饲料质量检测中可进行推广。 关键词 测定方法；饲料；粗蛋白；影响 在传统的饲料粗蛋白测定方法即国标法中，由于操 HCl 注 入 1000mL 蒸 作方法和实验仪器的原因，样本经消化、蒸馏、滴定诸 馏水中；0.02mol/L 道工序，易造成误差，费时费电。目前生产中常用的方 HCl 标 准 溶 液：将 法有国标法、凯氏定氮法、强碱直接蒸馏法、双氧水法、 1.67mL 分 析 纯 HCl 双缩脲法等。现有研究资料表明，后四种方法均优于国 注入 1000mL 蒸馏水 标法，但各有优缺点。本研究以几种不同的蛋白质测定 中；蔗糖：分析纯； 方法测定了一些有代表性的饲料原料，通过比较，以期 硫酸铵：分析纯，干 找到最好的测定方法。 燥；硼酸吸收液；双 氧水：分析纯，含量 1 试验材料 为30% ；酒石酸钾钠： 1.1 检样的采集、制备 分析纯；碘化钾：分 直接在生产单位采集三种有代表性的原料检样：鱼 析纯；蛋白质标准溶 粉、玉米蛋白粉、豆粕，分别采用四分法将检样缩至 液(4g/dL) 购自北京 500g，粉碎后全部通过40目筛，装于密闭容器中，防止 中生生物工程高技术公司。 试样成分变化或变质。 1.3 主要仪器 1.2 主要试剂 实验用样品粉碎机或研钵；40目分析筛；分析天平： 硫酸：化学纯，含量为 98%，无氮；混合催化剂： 感量 0.0001g；消煮炉或电炉；酸式滴定管；凯氏蒸馏 0.4gCuSO ，6gK SO 或 Na SO ，均为化学纯，磨碎混 装置；凯氏定氮仪；电热恒温水浴锅；玻璃烧杯；25mL 4 2 4 2 4 匀；NaOH：40% 水溶液，化学纯；硼酸：2% 水溶液， 具 塞 玻 璃 试 管；25mL、1000mL 容 量 瓶；1mL、5mL、 化学纯；混合指示剂：0.1% 甲基红乙醇溶液、0.5% 溴 10mL吸量管；100mL量筒；托盘天平等。 甲酚绿乙醇溶液，两者等体积混合，在阴凉处保存期 2 测粗蛋白的不同的分析方法 为 3 个月；0.1mol/LHCl 标准溶液：将 8.3mL 分析纯 2008.12 41 2.1 国标法 2.1.4.3 空白测定 称取蔗糖0.5g，代替试样，按照前 2.1.1 原理 国标法测定试样中含氮量，即在催化剂作 面的消化蒸馏方法进行空白测定，消耗0.1mol/L盐酸标 用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化为硫酸铵，加 准溶液的体积不得超过 0.2mL，消耗