708200REV1018抗双链DNA抗体检测试剂盒-InovaDiagnostics.PDFVIP

708200 REV 1.0 1 / 8 抗双链DNA抗体检测试剂盒（间接免疫荧光法）说明书 【产品名称】 通用名称：抗双链DNA抗体检测试剂盒（间接免疫荧光法） 英文名称：NOVA Lite dsDNA Crithidia luciliae 【包装规格】 60人份/盒 【预期用途】 用于体外筛查和半定量检测人类血清当中的抗双链DNA 抗体。 NOVA LiteTM 绿蝇短膜虫双链DNA 是一种间接的免疫荧光抗体检测方法，它使用了血鞭毛虫——绿蝇短膜虫作为 1 底物。这种单细胞生物体含有大量线粒体，在这些线粒体中，含有高浓度的环状双链DNA 。这种大量的双链DNA 被 称作动基体，它是以没有组蛋白或者其他哺乳动物核抗原的形式而出现的。这样使得它可以作为一种非常灵敏的、特异 的底物，用在对双链DNA 自身抗体的检测当中。 双链 DNA 自身抗体几乎都是出现在患有系统性红斑狼疮（SLE ）的患者体内，因此这一抗体也被认为是这一疾病 的标志性抗体。dsDNA 自身抗体已经被纳入到1982 年关节炎与风湿病协会的专业委员会所修订的系统性红斑狼疮分类 标准中。 708200 REV 1.0 2 / 8 【检验原理】 在间接免疫荧光检测技术中，样品与抗原底物一起孵育，未反应的抗体被洗去。底物随后与荧光素标记的特异连接 物孵育，而未结合的试剂也被洗去。当采用荧光显微镜观察的时候，自身抗体阳性的样品将发出苹果绿荧光，这种荧光 与自身抗体所结合的细胞或者核的面积相关。 【主要组成成份】 1. 绿蝇短膜虫(dsDNA)贴片, 6 孔/片, 含有干燥剂 2. 山羊抗人IgG 结合物，不含Evan’s 蓝, 荧光素的标记是在含有0.09%叠氮钠的缓冲液中进行的，4mL 3. dsDNA 阳性对照品，1 支，含有0.09%叠氮钠的缓冲液以及人抗dsDNA 抗体，已经经过预先稀释，0.5mL 4. IFA 系统阴性对照品，1 支，含有0.09%叠氮钠的缓冲液，不含人抗dsDNA 抗体，已经经过预先稀释，0.5mL 5. PBS 浓缩液(40x),可以配制1000 mL 6. 封片剂，含有0.09%叠氮钠的缓冲液，7mL 7. 盖玻片 【储存条件及有效期】 2-8℃温度下保存 12 个月。 1. 将所有试剂保存在2-8℃。不要冷冻保存。只要按照说明书的指示保存和操作，在有效期之前，试剂盒都是稳 定的。 2. 稀释后的PBS 缓冲液可以在2-8℃保存4 周。 【适用仪器】 具有495nm激发波长和515nm阻挡滤片的荧光显微镜。 708200 REV 1.0 3 / 8 【样本要求】 在收集血清标本的时候，应当采取本方法。在测试样品中额外加入叠氮钠或者其他防腐剂会影响测试结果。微生物 污染、经加热处理、或者含有可见的颗粒污染物的样品，请不要使用。明显溶血、或者混浊的血清或者样品都不要使用。 在收集血清之后，应当将血清与血凝块分离。NCCLS 文件H18-A2推荐的样品保存条件为：1)保存在室温下的样品 不要超过8小时；2)如果不能在8小时内完成检测，请将样品冷藏（2-8℃ ）保存；3)如果不能在48小时内完成检测，或者 需要将样品进行运输，请将样品保存在-20℃或者更低的温度下。冷冻的样品在解冻之后、检测之前，必须充分混匀。 【检验方法】 开始之前的准备工作 1. 将所有的试剂和样品放在室温下（20-26℃ ），充分混匀。 2. 稀释 PBS 浓缩液 ：重要事项：将PBS 浓缩液中的液体倒入装有 975mL 蒸馏水或者去离子水的瓶中，按照 1 ：40 的比例稀释PBS 浓缩液。PBS 缓冲液是用来稀释患者样品并作为冲洗液来是用的。稀释后缓冲液可以在2-8℃下稳 定保存1 周。 3. 稀释患者样品 ： a. 初始筛选：采用稀释后的PBS 缓冲液按照1:10 的比例稀释患者样品。(例如, 将100μL 血清