蛋白质研究简介-国立中山大学.PDFVIP

蛋白質研究簡介 國立中山大學生物科學系 許清玫 緒論 當 Watson 與Crick （1962 年諾貝爾生醫獎得主）在1953 年解開遺傳物質 DNA的構造之謎時，遺傳訊息的傳遞與細 胞內生物大分子的研究隨即開啟了新紀元。一般認為遺傳訊 息的傳遞是由 DNA 經RNA再到蛋白質，其中 DNA負責訊 息的儲存、RNA負責訊息的傳遞或暫時的攜帶者、而蛋白質 則是訊息的表現者。 1990 年為了解開人類生命的奧秘，人類 基因組計劃終於展開，而也在 2002 年提前完成。由於蛋白 質是遺傳訊息的表現者，唯有了解蛋白質的特性與功能，有 朝一日才有可能回答有關生命奧秘的問題，因而在所謂的後 基因組時代、人類蛋白質組計劃已經隆重登場了。 蛋白質的功能與形狀 蛋白質是細胞的主要成份，其重要性可由蛋白質在生物 體所擔任的多種功能得知：如擔任結構功能的角質蛋白、絲 纖維蛋白與膠原蛋白；擔任催化功能的各種酵素；擔任運輸 功能的血紅素、血青素與輸鐵蛋白；擔任運動功能如肌肉收 縮的肌紅蛋白及肌動蛋白；擔任防禦保護功能的抗體、補體 與防止血流不止的凝血酵素；擔任儲存功能的酪蛋白、卵白 蛋白與儲鐵蛋白；擔任調節管制功能的胰島素與生長激素； 及會引起食物中毒的細菌毒素及蛇毒蛋白等。通常在細胞內 擔任結構性角色的蛋白質，其形狀為纖維狀或條狀（如絲纖 維蛋白與膠原蛋白）；而擔任功能性角色的蛋白質，則為球 狀的（如血紅素與肌紅蛋白）。此外觀形狀不同的蛋白質過 去多以離心沉降的方法分析或以水溶性的差異加以區別。 蛋白質的分離與純化 要分析特定蛋白質的結構與功能，就必須將此蛋白質由 其原本存在的複雜環境（如細胞抽取液）中分離出，此通常 需經一系列步驟將許多非研究興趣的蛋白質移除而保留特 定蛋白質，此過程即為蛋白質純化。純化的蛋白質由於組成 均一而有多種用途：如進行活性分析的生理生化研究，進行 晶體析出的結構研究，及工業上固定化酵素的應用等。蛋白 質的分離與純化可依蛋白質的分子量大小、帶電特性、溶解 度及蛋白質與特定物質的非專一性 （如活性碳）或專一性 （如 抗體與抗原關係）的吸附作用等為分離的原理。 蛋白質的結構 蛋白質可由一條或多條多太鏈組成，因此其結構可依次 分為四級（圖一）。蛋白質的一級構造是指（各）多太鏈中 胺基酸的組成與排列次序；二級構造則是指連接各胺基酸的 太鍵間因氫鍵作用而形成的特殊且重複出現之結構，如α- 螺旋、β 褶片與β轉折等（ 與 因提出此類構造 - - Pauling Corey 的貢獻而同獲 1954年的諾貝爾化學獎）；三級結構是已具有 一、二級構造的多太鏈因胺基酸官能基間的交互作用，而折 疊扭轉成特有的緊密立體形狀；四級結構則是當具有生物功 能的蛋白質是由兩條或兩條以上的多太鏈（次單元）組成 時，次單元在立體空間的相互關係。而近年更有超分子結構 （ ）一詞出現，以描述不同蛋白質 supermolecular organization 在細胞內部因行使生物功能而必須產生交互作用的實際狀 態（如核糖體）。 維持蛋白質特有結構的作用力，除了一級構造的太鍵和 三級結構中的雙硫鍵為共價鍵外，其餘二、三、四級結構的 維持都是靠較弱的氫鍵、離子鍵、凡得瓦爾或疏水作用等非 共價的作用力，因此大部份的蛋白質只能在溫和的環境中發 揮其正常的生物功能。當環境（如溫度或 值）的改變過於 pH 激烈時，蛋白質會因維持結構的作用力受破壞而失去特有的 結構與活性，此即所謂的 變性 。由於蛋白質的變性通常只 “ ” 是蛋白質特有的形狀遭受破壞，繼而失去特有的生物活性， 因此有時候蛋白質的變性是可逆的，而此種蛋白質結構與功 能的密切關係更有 Anfinsen 等人以核糖核酸水解脢（RNase ） 進行一系列的實驗證明（圖二）。 是個含 個胺基酸