a-淀粉酶的生产与应用.docVIP

α-淀粉酶的合成与应用 谷君 摘要：酶, 发酵,生产,合成,应用 关键词：生产 应用 一，淀粉酶的产生菌及酶的特性 （1）淀粉酶可由微生物发酵产生， 也可从植物和动物中提取 ， 目前I业生产上都 以 微生物发酵法进行大规模生产 淀粉酶。在 1 9 0 8年和 1 9 1 7年德 国的 B o k i i n和 F A f r o n t [ 日先后由细菌中生产出 d ． 淀粉酶 ， 用于纺织品脱浆。1 9 3 7年 日本的福本口 获得了产生a 一 淀粉酶的括革杆菌。 第二次世界大战后， 由干抗 生素的发明， 使得微生物I业大步前进 ， 1 9 4 9年 Ⅱ - 淀粉酶开始采用深层通风培葬法进行生产。1 9 7 3年耐热性淀粉酶投入 了生产r 4 3 。随 淀粉酶 的用途 日蓝扩大， 产量 日见增多， 生产水平也逐 步提高。近些年我们国家的酶制剂行业发展较快 ， 从 1 9 6 5年开始应用解淀粉芽孢杆 菌B F 一7 6 5 8生产 淀粉酶， 当时仅无锡酶制剂厂独家生产， 近年在国内生产酶制剂的厂家已发展到 l 2 O多个， 其中约有 4 O 左右的I厂生产 淀粉酶 ， 产品也由单一的常温I业用 d 一 淀粉酶 ， 发展到现在有I业用也有食品鼓， 既有常温也有耐热的， 剂型上 有 固体 的也 有液 体 淀粉酶 。酶 制剂I业现 已成为近代I业生产 中不 可缺 少的组成部 门， 它对社会的贡献远远超过酶I业本身。 （2）世界 上许多国家都以枯草杆菌， 地衣芽孢杆菌生 产细菌淀粉酶和米 曲霉生产的真苗淀粉酶为 主要产品， 在工业生产中使用的菌种， 最初都 是从 自然中得到的， 通过筛选和诱变育种工 作， 可改变菌种的特性 ， 提高 n 一 淀粉酶 的活 力。O n t t r u p 以地衣芽孢杆苗AT C C 9 7 9 8为 出发菌株 ， 用 Y射线 ， N T G以及 uV反复 7次 诱变 ， 使其 n 一 淀粉酶 的产 量为原苗株的 2 5 倍。A n d r e e v a 等将枯草杆菌孢子悬浮液经 5 0 ℃加热处理 3 0分钟， 酶 合成速度提高了 2 —2 、 7倍 ， 可见采用诱变育种是行之有效的 方法 ， 但也有一定的局限性和缺点， 由于发生 平顶效应使之育种效果降低， 利用转化法改 良菌种 ， 在枯草杆菌 n 一 淀粉酶的生产苗上 已 取得可喜的结果 K a z u m a s a 等采用转化和 诱变结合的方法． 使 n 一 淀粉酶产量比亲株高 l 5 0 0 - -2 0 0 0倍 近年来 ， 随生物工程技术的 发展， 基因工程技术已应用到菌种的改造方 面。 P a l v a r 2 等把解 淀粉芽孢杆菌n 一 淀粉酶基 因克隆到枯草芽孢杆菌中， 其 n 一 淀粉酶活力 比 其 原 始 的 野 生 型 苗 株 高 5 0 0倍。 H e n a c h a n 又把地 衣芽孢杆菌 耐热 淀粉 酶基 因克隆到枯草芽孢杆苗中， 美国 C P C国 际公冠的 Mo f f c t 研 究中心 ， 已获得美国食品 药品管理局( F DA) 的批准， 可用其研制的基 因工程菌生产 淀粉酶， 这是第一个由 F D A 批 准用基因工程 菌生 产的酶髑剂 。。 我国在利用基因 重组构建耐热性 一淀粉酶方面已取得一定 的进展， 何超刚[ 3 等将脂肪嗜热芽孢杆菌淀 粉酶 基 因质粒 带人大 肠 杆菌 ， 使后 者具 有生 产高淀 粉酶 能力 。任大 明0 将 带有淀粉酶基 因的克隆片段 ， 在枯草杆菌中得到表达。 朱卫 民将枯草杆菌 a淀粉酶基因在大肠杆苗中 的得表达 。 二 淀粉酶的纯化 和提 取 为了提高收率、 降低成本 ， 对酶回收所做 努力不亚于改进发酵工 艺 。从发酵 液作成酶 翩剂所用单元操作主要 是固液 分离 、 浓缩 、 沉淀以及干 燥 、 粉碎 。其 中固液分离是个关 键。由于发酵液 固型物呈胶质状， 特别是细苗发 酵液带阴电荷 ． 固液分离困难 ， 必须通过聚电 解质絮凝剂处理 ， 再在硅藻土等助滤剂存在 下用板框压滤机过滤 工业酶制剂有液体和 固体 两种形态， 液体酶是除菌浓缩液加入稳 定剂和防腐剂， 再标准化而成。 固体酶最简便 方法是将浓缩酶液喷雾干燥 ， 或者用盐析和 溶剂 沉淀的方 法 。目前 我国 对 a 一 淀粉 酶 下游 工 程 的 研 究 做了许多工作。王玉华口 报导在发酵液中加 硫酸铝 0 ． 4 7 ． 再加分子量 2 0 0万的聚丙烯 酰胺 2 9 4 mm ol ／ l絮凝， 漏 斗中过 滤可提高 2 ． 9倍。刘叶青” 报导用磷酸钙凝胶絮凝 一 淀粉 酶发酵液 ， 再