金雀异黄素对iNOS表达影响与抑制胃癌细胞增殖作用研究3.PDFVIP

金雀异黄素对 iNOS 表达影响与抑制胃癌细胞增殖作用研究 宋丹凤 　崔洪斌 ( 哈尔滨医科大学公卫学院 ,黑龙江 　哈尔滨 　150001) 摘 　要 :为研究金雀异黄素对人胃腺癌细胞 SGC7901 增殖 、DNA 合成 、一氧化氮产生量 、一氧化氮 ( ) 合酶活性及其对诱导型一氧化氮合酶 induced nitric oxide synthase ,iNOS 基因表达的影响 , 应用 3 MTT 、HTdR掺入 、DNA 琼脂糖电泳 、分光光度法 、免疫组化及 RTPCR 方法 ,研究 Gen 抑制癌细胞生 长的机制 。结果表 明 Gen 抑制 SGC7901 细胞的增殖 、DNA 合成 , 诱导细胞凋亡 , 并可显著诱导 iNOS mRNA转录 、增加 iNOS 蛋白表达 ,促进一氧化氮产生 ,提高一氧化氮合酶活性 。为将 Gen 应用 于胃腺癌的化学防治提供了实验依据 。 关键词 :异黄酮类 ;癌 ;一氧化氮合酶 ;一氧化氮 ( ) 中图分类号 :R15 ;Q946 　　文献标识码 :A 　　文章编号 :1004 - 8456 2002 03 - 0010 - 04 ( ) ( ) 　　金雀异黄素 genistein , Gen ,即 5 ,7 ,4 ’- 三羟异 中。二甲基亚砜 DMSO 溶解 Gen ,配制成 20 mgmL 黄酮 , 是大豆异黄酮类化合物的主要成分 ,主要来 的储备液 ,用培养液稀释至所需浓度 。DMSO 在各 自大豆膳食 。Gen 具有雌激素活性 ,故被称作植物 组培养液中的终浓度均为 01 % 。 雌激素 。流行病学调查 、动物实验和体外实验研究 ( 3 1. 3 　MTT 试验 　细胞接种于 96 孔板 5 ×10 资料显示 , Gen 对性激素依赖的肿瘤具有较好的抑 ) 个孔 ,培养 24 h 后 ,加入 Gen 使终浓度分别为 5 、 [ 1 ,2 ] 制作用 。 目前国外 Gen 抗癌作用研究主要集中在 10 、20 μ gmL ,设 4 个平行孔 ,另设溶剂对照组 ,于第 乳腺癌 、前列腺癌和结肠癌等性激素依赖的肿瘤 ,对 μ 五天加入 5 mgmL MTT 20 L ,再培养 4h 后倒尽板 [3～5 ] 抑制胃癌生长作用研究较少 。 而 胃癌在我国高 中的培养液 ,加 150 μ L DMSO ,轻轻振动后用酶标仪 发 ,且其发病与饮食关