检查粪便中的蠕虫卵、原虫包囊和滋养31 - 病原生物学教研室.pptVIP

三、鼠疟原虫接种实验 取已感染鼠疟原虫的小白鼠一只，从眼眶、尾巴或心脏取血0.2ml，用生理盐水稀释到1ml，摇匀。用结核菌素注射器吸取0.1ml稀释的含原虫血液，在无菌操作的条件下，给健康小白鼠作腹腔内注射。感染后，作标记并置饲养笼内喂养，留待下周实验使用。 4.试管钩蚴培养法 原理： 根据钩虫卵在适宜的条件下（25-35℃，相对湿度为60%-80%，空气充足），约3d后，钩蚴即可在卵内发育成熟，并脱壳而出，由于钩蚴具有趋湿性，孵出后的钩蚴多集中于试管底部水中。 4.试管钩蚴培养法 优点： 此法对检出率与饱和盐水浮聚法相近 且可鉴别虫种 缺点： 所需时间较长，3-5d后才有结果 （操作录像8） 5.毛蚴孵化法 用途： 此法用于血吸虫病患者的粪便检查，对于慢性患者或某些轻度感染者尤其适合，（虫卵数较少，直接涂片法易漏检） 原理： 尼龙筛集卵法 + 水中孵化 5.毛蚴孵化法 优点： 可进行全粪检查，检出率高 准备工作： 孵化所用的自来水需放置过夜，去氯后再用于毛蚴孵化。 （操作录像9） 6.改良加藤厚涂片法 改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法），首先由加藤氏（Kato.K.，和Miura.M.1954）提出，后经改进而成。 由于其操作简单，可用虫卵计数，因此不少国家和地区多采用改良加藤法进行肠道蠕虫的普查及防治效果的考核，在亚洲寄生虫防治组织第三次会议上正式将此法列入肠道寄生虫病防治效果考核的标准化方法之一。 （操作录像10） 改良加藤法结果计算（虫卵计数）： 每克粪便虫卵数（EPG）= 虫卵数×24×粪便性状系数 粪便性状系数： 半成形粪便为1.5 软湿形粪便为2 粥状粪便为3 水泻形粪便为4 7.虫卵计数法（司徒尔氏稀释虫卵计算法） 取刻有56和60ml刻度的三角烧瓶一个，加入 0.1N NaOH溶液至56毫升刻度处，加被检粪便于烧 瓶内，使瓶内液面上升至60ml刻度处(相当于4g粪 便)投入10 多个小玻璃球于瓶内，塞紧瓶口，用力 摇荡。2h后，充分摇匀，吸取0.15ml粪便悬液致载 玻片上，盖上大的盖玻片，在低倍镜下计算出全玻 片虫卵数,最好连数两张，求得平均虫卵数。 （操作录像11） 7.虫卵计数法 每克粪便虫卵数(EPG)= 0.15ml中虫卵总数×100 总虫卵数 = EPG×24小时粪便总重量 对稀粪中所求得的虫卵数应以纠正： 　　 半成形粪便×1.5 　 　软便×2 　 　稀便×2 　　 水样便×4 ? 7.虫卵计数法 此法还可用于成虫计数，计算公式如下： 雌虫数 = 总虫卵数 / 已知雌虫每天排卵总数 成虫总数 = 雌虫总数 / 2 下次课准备 自检蠕形螨 取一定大小的单面透明胶，在睡前贴在鼻尖、左右两侧的鼻翼、鼻唇沟等部位，次日起床后揭开，贴附在干净载玻片上，置镜下找虫。 寄生虫实验五 病原生物学教研室 董颖 第五次实验课安排 一、寄生虫形态观察 1.溶组织内阿米巴滋养体、包囊 2.结肠阿米巴滋养体、包囊 二、取狗粪便，做钩虫卵检查 三、鼠疟原虫接种实验 溶组织内阿米巴生活史 成熟包囊 小滋养体 不成熟 包囊 大滋养体 （结肠、肝、脑、皮肤、肺） 人肠腔 人肠腔 （人误食） 侵入组织 溶组织内阿米巴生活史 1.大滋养体（铁苏木素染色） ???虫体外质透明，可见舌状或指状伪足，内质呈颗粒状，颗粒细小而均匀，内有一个核，圆形，核膜内缘的染色质粒大小较一致，排列整齐，核仁小而圆，位于中央。部份滋养体内质含有红细胞，红细胞的形态随消化程度不同而异。有些滋养体内质还含有空泡。 溶组织内阿米巴 2. 包囊 ⑴铁苏木素染色标本 包囊呈圆球形，染成蓝黑色。囊壁厚，不着色。核通常1 ～4个，成熟包囊具4个核，核结构与滋养体相同，糖原泡在染色时被溶解，成为空泡，拟染色体深蓝色，棒状，两端较钝圆。成熟包囊常缺拟染色体。 2. 包囊 ⑵碘液染色标本 染色后包囊呈棕黄色，圆球形，囊壁不着色，发亮。核呈小圆圈状、糖原泡着色较深，边界不明显。拟染色体呈亮捧状。 检查豚鼠结肠内阿米巴 1.解剖豚鼠，取一小段结肠 2.将结肠组