201010578924-一种产角质酶基因...-申请公开.pdf

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201010578924-一种产角质酶基因...-申请公开

SooPAT 一种产角质酶基因工程菌及其应 用 申请号:201010578924.1 申请日:2010-12-08 申请(专利权)人江南大学 地址 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号 发明(设计)人吴敬 吴丹 王蕾 陈坚 主分类号 C12N1/21(2006.01)I 分类号 C12N1/21(2006.01)I C12R1/19(2006.01)N 公开(公告)号102080063A 公开(公告)日2011-06-01 专利代理机构 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 代理人 王秀丽 注:本页蓝色字体部分可点击查询相关专利 (19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102080063A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102080063 A (43)申请公布 日 2011.06.01 (21)申请号 201010578924.1 (22)申请 日 2010.12.08 (71)申请人 江南大学 地址 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800 号 (72)发明人 吴敬 吴丹 王蕾 陈坚 (74)专利代理机构 北京汇信合知识产权代理有 限公司 11335 代理人 王秀丽 (51) Int.C l. C12N 1/21 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01) C12N 9/16 (2006.01) C12R 1/19 (2006.01) 权利要求书 1 页 说明书 5 页 (54) 发明名称 一种产角质酶基因工程菌及其应用 (57) 摘要 本发明公开了一种产角质酶基因工程菌 及其应用,属于生物工程技术领域。构建重组 质 粒 Tfu_0883-hlyAs/pET20b (+),并 转 化 大 肠杆菌E.coliBL21(DE3),得到重组大肠杆菌 Tfu_0883-hlyAs/pET20b (+)/E.coliBL21(DE3)。 采用补料分批发酵的方式控制一定的比生长 速率,发酵培养30-34h,发酵上清酶活达到 700-750U/mL。本发明以甘油为主要原料,采用半 合成培养基,具有稳定性好,便于调控等优点,适 于大规模生产。 A 3 6 0 0 8 0 2 0 1 N C CN 102080063 A 权 利 要 求 书 CN 102080066 A 1/1 页 1. 一种产角质酶基因工程菌,是将角质酶Tfu_0883 基因和hlyAs 基因导入大肠杆菌。 2. 一种产角质酶基因工程菌,其特征在于,该基因工程菌是携带重组质粒 Tfu_0883-hlyAs/pET20b (+) 的大肠杆菌E. coli BL21 (DE3)。 3. 根据权利要求1 所述的基因工程菌,其特征在于,具体构建方法如下: 以质粒Tfu_0883 /pET20b (+) 为模板扩增角质酶Tfu_0883 基因; 以E. coli CFT073 总DNA 为模版扩增hlyAs 的基因; 以Tfu_

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