[理学]生物化学第十一章蛋白质合成.ppt

第十二章 蛋白质的生物合成 蛋白质合成的场所是核糖体,原料是20种L-氨基酸，反应所需能量由ATP、GTP提供，此外还有Mg2+、K+ 等金属离子参与。 蛋白质合成体系主要由mRNA、tRNA、rRNA、有关的酶以及几十种蛋白质因子组成。 第一节 蛋白质合成体系的重要组分 mRNA和遗传密码 tRNA rRNA和核糖体 参与合成的蛋白因子 遗传密码的特点 （5）密码子的基本通用性（近于完全通用） 无论病毒、原核生物还是真核生物都共用一套密码子，但真核生物线粒体的遗传密码与通用密码有区别。 二、tRNA: 在蛋白质合成中，起着运载氨基酸的作用，按照mRNA链上的密码子所决定的氨基酸顺序将氨基酸转运到核糖体的特定部位。 同功受体tRNA:把携带相同氨基酸而反密码子不同的一组tRNA称为同功受体tRNA。一种氨基酸可以有一种以上tRNA作为运载工具。 反密码子 tRNA分子上三个特定的碱基组成一个反密码子，位于反密码子环上，与mRNA链上的密码子互补配对。 三、rRNA及核糖体 核糖体是由几十种蛋白质和几种rRNA组成的亚细胞 颗粒,其中蛋白质与rRNA的重量比约为1:2。核糖体是蛋 白质合成的场所。 核糖体的存在形态有三种：单核糖体、核糖体亚 基和多核糖体。 第二节 蛋白质的合成过程 tRNA与多肽合成的有关位点 3’端-CCA上AA接受位点 识别氨酰-tRNA合成酶位点 核糖体识别位点 反密码子位点（识别mRNA上的密码子） 二、肽链合成的起始 起始密码子的识别： 起始AUG一般位于mRNA距5’端25个核苷酸以后，并在其上游（5’端）约10个核苷酸处有一段富含嘌呤的序列（SD序列），原核生物核糖体30S小亚基上的16SrRNA3’端富含嘧啶的序列能与之互补配对。 在肽链合成起始时，首先是核糖体小亚基与mRNA上的核糖体结合位点识别结合，然后，大亚基与小亚基结合，形成完整的核糖体。 以上三步为一个延伸循环，肽链每掺入一个氨基酸就重复一次延伸循环。 肽链合成方向从N-C 四、肽链合成的终止与释放 当终止密码子出现在A位时，终止因子结合在A位，肽链合成终止。 蛋白质的合成是一个高耗能过程 AA活化 2个高能磷酸键（ATP） 肽链起始 1个（70S复合物形成，GTP） 进位 1个（GTP） 移位 1个（GTP） 1、 水解 N末端的(甲酰)甲硫氨酸的切除 在去甲酰酶催化下将肽链合成的起始氨基酸--甲酰甲硫氨酸水解去掉甲酰基，以便肽链形成所需的构象 在氨肽酶催化下切去N末端一个或几个氨基酸。 多肽链还未释放时，上两个过程已发生。而真核生物合成15-30氨基酸时，就已开始上过程。 水解断裂 如动物体中蛋白酶形成的是无活性的酶原，到消化道后，水解切下一部分肽链，使酶原变成有活性的酶。 2、氨基酸侧链的修饰 脯氨酸、赖氨酸侧链发生羟基化作用。 苏氨酸、丝氨酸、酪氨酸羟基磷酸化。如糖原磷酸化酶 糖基化作用使蛋白质多肽链转变成糖蛋白（N-糖苷键和O-糖苷键）。 3、加辅基 结合上辅基（酶）才具生物活性，如乙酰辅酶A羧化酶与生物素的结合。 4、二硫键的形成 两个半胱氨酸-SH氧化 现在已经知道作为多肽合成起始信号的密码子有两个，即甲硫氨酸的密码子(AUG)和缬氨酸的密码子(GUG)(极少出现)。在大肠杆菌中, 起始密码子AUG 所编码的氨基酸并不是甲硫氨酸本身, 而是甲酰甲硫氨酸。 fMet-tRNAf的形成 Met-tRNAf + N10-甲酰FH4 fMet-tRNAf + FH4 甲酰化酶 真核生物：Met-tRNAMet。真核生物无甲基化过程，起始氨基酸是Met,起始tRNA为tRNAiMet fMet-tRNAifMet 30S复合物形成 30S亚基能与mRNA结合(IF3参加，识别起始密码子AUG），在IF1参与下，30S-mRNA-IF3进一步与fMet-tRNAf、GTP结合，并释放IF3，形成30S复合物：30S-mRNA- fMet-tRNAf 30S起始复合物与50S大亚基相结合，形成70S复合物时，消耗一分子GTP，并释放出IF1和IF2。 70S起始复合物的形成 三、肽链的延伸 分为三步： 1、进位 新的氨酰- tRNA进入A位。需要消耗GTP，并需EF-Tu（热不稳定）,EF-Ts（热稳定）两种延伸因子。 EF-Tu-GTP+下