[理学]第六章化学毒物的一般毒性作用.ppt

第六章 化学毒物的一般毒性作用 第一节 急性毒性作用及其评价 第二节 蓄积毒性作用及其评价 第三节 亚慢性和慢性毒性作用及其评价 第四节 联合毒性作用的评价 第五节 局部毒性作用 §第一节 急性毒性作用及其评价 一、基本概念 二、急性毒性和急性毒性试验的目的 三、急性毒性试验设计 四、急性毒性评价 一.急性毒性的概念 是指机体一次或在24小时内多次接触外源化学物后在短期内(一般最长14天)所产生的毒效应，包括一般行为和外观改变，大体形态变化以及死亡效应。 二、急性毒性试验的目的 1.获得受试物对实验动物的致死剂量 （LD50）及其它毒性参数(急性毒作用带Zac: acute effect zone) Zac=LD50 / Limac 2 .初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂量反应关系和对人体产生损害的危险性 3 .为亚慢性、慢性毒性试验及其他毒理学试验的剂量设计和观察指标选择提供参考依据。 4.为急性中毒的治疗和中毒机制的研究提供线索 三、急性毒性试验设计 (一)试验动物 [原则]： ①急性毒性试验要求选择对化学毒物的代谢和毒效应表现与人的反应尽可能一致的试验动物。 ②动物易于获得 ③品系纯化 ④价格较低和易于饲养等条件。 三、急性毒性试验设计 1．试验动物的种属和品系 最好用两种种属的动物 啮齿类:小鼠、大鼠、豚鼠或家兔 非啮齿类：狗或猴。 急性皮肤毒性试验可选用成年大鼠、豚鼠或家兔，优先考虑白色家兔。而急性吸入毒性试验和经口急性毒性试验则优先考虑大鼠。 三、急性毒性试验设计 ⒉试验动物的年龄和体重： 急性试验动物不宜过老或过幼，通常要求选择刚成年动物进行试验，而且须是未曾交配和受孕的动物。例如：大鼠180～240g、小鼠18～25g、家兔2～2.5kg、豚鼠200～250g、狗10～15kg。同一批试验动物体重变异范围不应超过该批动物平均体重的20％。 三、急性毒性试验设计 3.试验动物的性别： 急性毒性试验的主要内容是求LD50，除特殊要求外，一般急性毒性试验对动物性别要求为雌雄各半。如果在预试验时发现化学毒物(如农药)对雌、雄动物毒效应的敏感性有明显差异，则应单独分别求出雌性与雄性动物各自的LD50。如果试验是为致畸试验作准备，也可仅作雌性动物的LD50测试。对精子毒性试验仅选雄性动物。 三、急性毒性试验设计 4.动物数量与随机分组： 一般分为5－7组 大、小鼠等小动物 每组10只 狗等大动物 每组6只 分组原则——随机化原则 5.禁食： 经消化道染毒时，要求试验前对动物禁食 大鼠、小鼠——隔夜进食；染毒后禁食4h 大动物——每日上午喂食前染毒 染毒后继续禁食2~4h，但在禁食时要保障饮水。 6.实验动物的预检： 选择健康动物 1~2周的检疫期 三、急性毒性试验设计 （二）试验动物的饲养环境 恒定的温度：22±3℃ 湿度：30~70% 照度：昼夜各半 饲料合格、饮水合格、垫料合格 三、急性毒性试验设计 （三）染毒途径的选择: 染毒途径（exposure routes）的选择需考虑：模拟人在生活和生产环境中实际接触受试物的途径和方式；有利于不同化学物之间急性毒性大小的比较；受试物的性质和用途；各种受试物毒性评价程序的要求等。 最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注射途径。 三、急性毒性试验设计 经口(胃肠道)接触 : 灌胃:小鼠0.2?1.0ml/只或0.1?0.5ml/10g 大鼠一次灌胃体积不超过5ml/只 家兔不超过10ml/2kg 狗不超过50ml/10kg 吞咽胶囊: 经呼吸道接触 : 静式吸入 动式吸入 经皮肤接触 : 注射途径接触: 三、急性毒性试验设计 （四）染毒剂量与分组: 1．预试验 （1)查阅文献 ①了解化学毒物的结构式、分子量、常温常压下的状态、熔点、沸点、密度、闪点、挥发度、蒸气压、水溶性和脂溶性等理化特性，生产批号及纯度，杂质成分与含量等。 ②确定使用哪一种计算方法求LD50，然后再设计剂量分组。LD50的计算方法常用寇氏法、概率单位法、霍思法等。 ③找出与受试化学毒物结构与理化性质近似的化学物的毒性资料，并以文献资料中相同的动物种系和相同接触途径所测得的LD50(LC50)值作为受试化学物的预期毒性中值。 三、急性毒性试验设计 （四）染毒剂量与分组: (2)预试验的剂量设计 ① 等比剂量设计（已知LD50剂量，并在该剂量的上下各设计l一2个剂量组作为预试验剂量。） ② 3x3法：取9只动物，分为3组，每组3只，以三种不同剂量处理，组距拉大一些。（对于无资料可参考的受试物，为节省动物。） ③