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临床微生物实验室规范操作草案 第一部分标本采集和运送 标本采集和运送是细菌培养成功的最重要的关键，但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道问题所在之处，由此引发的最主要后果是阳性率下降，这也是临床医生最不能接受的问题，为此建议来一次革命，用输送培养基代替传统的标本的容器。 血液及骨髓标本采集运送的规范条例 1、采血时间：尽可能在用抗生素前，心内膜炎除外。 2、采血量：采一次或采一瓶是错误的，至少应采一套2瓶，分需氧和厌氧。2瓶血量不少于16-20ml，先将10ml注入需氧瓶，再将剩余血注入厌氧瓶。儿童：采血量是总血量的1％。(儿童败血症含菌量是成人的10-100倍) 体重Kg 抽血量ml 套（需氧+厌氧） 1 1-2 1 1.1-2 4 2 2.1-12.7 6 2 12.8-36.3 20 2 ≥36.3 40-60 2-3 3、采血方法：不要与血气和血沉标本一起采血；不推荐血入瓶前换针头；不推荐静脉血直接入瓶；不宜在静脉导管或静脉留置口采血。 4、采血间隔：如第一次采集2套（4瓶）血培养标本，在以后的2-5天不必采血，但除外心内膜炎和导管相关性败血症。 5、迟延培养瓶处理：迟延培养瓶不要放冰箱或孵箱，放常温，尽早送往临床细菌室。 注：皮肤消毒液推荐：建议先用70-80％异丙醇去酯，再用葡萄糖酸氯乙定消毒。 其他无菌体液的采集运送规范 临床常用于培养的无菌体液包括脑脊液、胆汁、胸腹水等。由于无菌体液细菌培养的价值远高于有菌部位标本。所以无菌部位的采集和运送应遵循以下准则： 1、无菌采集是培养成功的首要因素 2、采集的标本应立即送至临床细菌室，胸膜炎球菌有自溶酶，离体后会迅速自溶。肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等对温度敏感的细菌在冰箱会很快死亡。 泌尿标本采集的规范 1、采集后的标本应立即送检。 2、采集时间：多数药物从尿道排泄，所以不管用哪种方法都应在用药前采集。应采集早晨第一次的尿。 3、标本管不应含防腐剂和消毒剂。 4、采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗。 5、长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。 6、做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿。 分泌物采集规范 1、对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、扁桃体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属于开放性病灶。应先用无菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可去感染部位下的组织送检。 2、闭锁性脓肿：如淋巴脓肿、肺脓肿、肝脓肿、腹腔脓肿、盆腔脓肿等，对封闭的脓肿常采用穿刺或引流的方法采样，应在用药前采集，应注意脓液的气味、性状、颜色注意厌氧菌存在的可能。不能及时送检应应用输送培养基。 便标本采集规范 1、采集时间：腹泻患者应在用药前、急性期采集；沙门菌感染、肠热症应在2周内采;厌氧菌出现症状即采集。 2、采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有脓血和黏液的部位的粪便2-3克，如液状粪便取絮状物盛于无菌的、密封的、不吸水的、容器内或直接盛于增菌液或保存液中;对不易获得粪便患者及幼儿，可用直肠拭子采集后置保存液或输送培养基中送检。 3、注意事项： （1）虽然粪便标本本身含很多细菌但也要用无菌容器。 （2）在患者病情许可的条件下应在用药前采集标本。 （3）应床边接种或置输送培养基送检。 （4）厌氧细菌（艰难梭菌）培养的标本应尽量减少与空气接触。 痰标本的采集和运送条例 1、标本采集时间：用抗生素前；晨痰; 2、采集方法： （1）自然咳痰：用清水漱口3次，应包括咽喉部，用力咳出痰，与灭菌容器中或输送培养基中。 （2）帮助咳痰：不易获得痰的患者可雾化吸入加温的氯化钠（45℃10％氯化钠水溶液） （3）支气管镜或支气管毛刷：由医生采集，建议直接种入输送培养基。 （4）胃内采集痰标本：婴幼儿不会咳痰而且常把痰误咽入胃中。可在清晨，用胃管插入胃内，用注射器抽出胃液。 （5）小儿采集痰标本：用压舌板刺激咳嗽使肺部和器官的分泌物喷出，用拭子采取标本送检，如不能立即送检应种入输送培养基。 厌氧培养标本采集规范条例 1、痰标本的厌氧培养标本采集：必须用气管穿刺法获得痰液，从口腔吐出的痰标本不能用于厌氧培养。 2、尿标本的厌氧培养标本采集：耻骨上膀胱穿刺获得尿标本可用于厌氧菌培养 3、便标本厌氧培养标本采集;可用排出的便作厌氧培养但也应少与空气接触。 第二部分标本培养前规范草案 合格的标本是培养成功的最重要的因素，实验室有权利对不合格提出终止检查或要求重送标本的要求，因此实验室必须建立标本接种前的质量控制和标本合格的检测。要求对除血液外的标本均作涂片革兰染色检查，用于评价标本的质量和区别分离细菌是定植菌或致病菌。 血液培养 疑是感染患者首次