[工学]核酸与蛋白质合成2011-8.pdfVIP

本章主要内容 一、DNA指导下的RNA 的合成：转录 二、转录后RNA的加工 三、RNA指导下DNA的合成：逆转录 四、RNA指导下的RNA的合成：RNA复制 〔目的要求〕 1. 理解并掌握转录、模板链、有意义链、启动子、终止子 等概念。 2. 理解原核生物转录的过程，了解真核生物的转录过程。 3. 了解三种RNA （mRNA、tRNA 、rRNA ）前体的加工过程。 4. 了解内含子的四种剪切机制，理解核酶在RNA加工过程中 的作用。 5.掌握逆转录、RNA复制的概念，了解逆转录、RNA复制的 在，了解逆转录酶、RNA复制酶的催化特性。了解真核细 胞 染色体端粒的作用及合成方式 一、DNA指导下的RNA的合成 转录与DNA复制比较 DNA指导下的RNA聚合酶 大肠杆菌的转录过程 启动子与终止子 真核生物的转录过程 RNA生物合成抑制剂 返回 转录(transcription)：以DNA为模板，根据 碱基配对的原则合成与DNA互补的RNA的过程。 （一）转录与DNA复制的比较： 1、相同点： 都需要模板 都以三磷酸核苷酸为底物（NTP或dNTP） 合成方向都是5→’3’ 返回 2、转录与DNA复制的不同点 转录不需引物； 只转录DNA分子中的一个片段（称为转录单位或操纵 子,operon)； 哪个基因被转录与特定的时间、空间、生理状态有关。 RNA聚合酶无校对功能。 不对称转录：在基因内只有其中一条链能进行转录 在转录中，双链DNA只有一条是模板，称为 模板DNA链非编码链 反意义链 （- ）链 另一条链则称为 非模板DNA链 编码链 有意义链 （+ ）链 实验证明：DNA分子上编码链和非编码链是相对的 ，在同一DNA分子的某些部分基因以这条链作为模板 链，而在另一区域别的基因中则以另一条链为模板链 。即存在着一组基因与另一组基因模板的改链。 （二）DNA指导下RNA聚合酶： 1、RNA聚合酶：催化性质 四种核苷三磷酸（ATP、GTP、CTP、UTP）为底物； 模板以双链状态下活性最大； 聚合酶无校对功能； 转录时双链局部解开，新生RNA链与模板链形成杂 螺旋，转录结束后，DNA双螺旋恢复，RNA释放。 返回 3、大肠杆菌的RNA聚合酶 大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由5种亚基α ββ’ωσ组 2 成，σ因子与其它部分的结合不是十分紧密，它易于与 β’ βα分离，没有σ、ω亚基的酶称为核心酶——只 2 催化链的延长，对起始无作用。σ称为起始因子。 大肠杆菌RNA聚合酶各亚基的功能 亚基 基因 Mr 亚基 功能 数目 α rpoA 40,OOO 2 酶的装配，与启动子上游 元件和活化因子结合 β rpoB 155,000 1 结合核苷酸底物，催化磷 酸二酯键形成 β’rpoC 160,000 1 与模板结合 σ rpoD 32,OOO- 1 识别启动子，促进转录 92，000 的起始