高效液相色谱仪实用技术教学教材演示幻灯片.pptVIP

高效液相色谱仪实用技术 Contents 一、HPLC的基本结构 Waters Acquity UPLC 高压输液泵 耐高压（150 ~ 350 × 105Pa） 耐腐蚀 密封性好 无脉动或脉动极小，流量恒定（RSD0.3%） 补充：1bar ≈14.5psi = 105Pa（145psi = 1MPa） 高压输液泵要求 高压输液泵类型 恒压泵 恒流泵 螺旋传动注射泵 往复柱塞泵 往复柱塞泵结构 a. 低压梯度（也叫外梯度）：在常压下，预先按一定程序将两种或多种不同极性的溶剂混合后，再用一台高压泵输入色谱柱。 b.高压梯度 ( 或称内梯度系统 ) ：利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按设定的比例送入梯度混合室，混合后，进入色谱柱 六通阀的结构原理 3、六通阀的使用及清洗 推荐清洗方法： 在load与inject之间切换清洗 推荐使用方法 完全填充环：进样量为定量环体积的2~5倍 部分填充环：进样量不大于定量环体积的1/2 （注：阀切换速度过慢会对泵造成损伤，并影响进样量的准确度） 4、色谱柱的维护及清洗 柱接口的维护 预柱的清洗：3阶段 反相键合相色谱柱的清洗顺序：由样品和流动相组成决定 5、检测器的维护 氘灯（寿命2000h左右） 不宜频繁开关 不使用时最好关闭 冲柱时可以不接检测器 三、常见故障的排查及解决 1、泵前流路气泡 原因： 滤头堵 流动相脱气不彻底 解