[理学]基因工程1.pptVIP

第二章 基因工程 本 章 内 容 基因工程的概念 基因工程的理论基础及发展史 载体 目的基因的获得 目的基因的表达 基因工程的应用 基因工程的概念 基因工程的定义 简单地说，基因工程就是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞（也称宿主细胞或寄主细胞）内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。这样，通过培养这种携带有外源基因的重组微生物，我们就可以得到其编码的蛋白质或者相应的代谢产物。 基因工程的核心内容是在分子水平上对生物的遗传特性进行有目的的改造。 基因工程的概念 基因工程的基本步骤包括： 带有目的基因的DNA片段的获取 目的基因与载体的体外重组 重组DNA分子导入受体细胞 含重组体的细胞群体的繁殖扩增 重组体的筛选 目的基因的表达 基因工程的概念 I 基因工程的概念 II 基因工程的概念 目的基因与载体的体外重组 基因工程的概念 胰岛素生产菌的构建 基因工程的概念 基因工程的实施的四个基本要素 （1）工具酶 （2）基因 （3）载体 （4）受体细胞 基因工程的概念 基因工程的类似名称 遗传工程（genetic engineering） 基因工程（gene engineering） 基因操作（gene manipulation） 重组DNA技术（recombinant DNA technique） 分子克隆（molecular cloning） 基因克隆（gene cloning）…… 基因工程的理论基础及发展史 核酸的组成 DNA是遗传物质 双螺旋与半保留复制 中心法则与三联体密码 操纵子模型 工具酶的发现 基因工程的诞生 基因工程的理论基础及发展史 核酸的组成 19世纪末，德国科学家科赛尔（Albrecht Kossel）将细胞核中提取出来的核酸水解，发现它含有3种成分：糖、磷酸和有机碱。而有机碱又含有4种成分：胸腺嘧啶（用“T”表示）、胞嘧啶（用“C ”表示）、腺嘌呤（用“A ”表示）、鸟嘌呤（用“G ”表示）。这样，就使人们对细胞核有了更加深入的认识。科赛尔也因为在细胞核化学成分研究方面的贡献而获得了1910年的“诺贝尔生理学或医学奖”。 基因工程的理论基础及发展史 有机碱 基因工程的理论基础及发展史 后来，科赛尔的一个学生发现核酸里的糖只有五个碳原子，比普通糖少一个碳原子，就叫它核糖；他又发现有些核糖少一个氧原子，就命名为脱氧核糖。由于核酸所含的糖不同，又分做核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。在核糖核酸里，没有胸腺嘧啶（T），代替它的是尿嘧啶（U），其他碱基则与脱氧核糖核酸相同。对大部分生物，DNA是遗传信息的携带者。 基因工程的理论基础及发展史 核糖和脱氧核糖 基因工程的理论基础及发展史 尿嘧啶（U）和胸腺嘧啶（T） 基因工程的理论基础及发展史 核糖、碱基和磷酸的连接 基因工程的理论基础及发展史 DNA是遗传物质 早在19世纪中叶，孟德尔就已经通过他的豌豆实验总结出了经典遗传学的基本定律。 到20世纪初，摩尔根更进一步确定遗传信息位于染色体上，并提出了著名的基因学说。 但携带遗传信息的究竟是什么物质呢？ 基因工程的理论基础及发展史 细菌的转化实验 很多细菌能吸收体外环境中的DNA分子并从中获得基因，这个过程称为转化。1928年,英国的细菌学家格里菲斯（Frederick Griffith）报道了肺炎双球菌的转化现象，这一历史性的发现最终促使人类首次认识到DNA是遗传物质。 基因工程的理论基础及发展史 肺炎双球菌是导致肺炎的致病细菌。它们的细胞外面通常有一层荚膜。荚膜的存在使得它们在固体培养基上长成光滑的菌落。这样的肺炎双球菌称为光滑型肺炎双球菌，它们可以使小鼠染上肺炎。光滑型肺炎双球菌又可以分成几十种不同的类型，分别称为光滑I型、光滑II型、光滑III型……等等。它们的荚膜的化学结构各不相同。 在进行人工培养的过程中，会产生一种失去荚膜的变种。这种变种在固体培养基上形成粗糙的菌落，因此称为粗糙型肺炎双球菌。这种变种失去了致病能力，不能使小鼠染上肺炎。 基因工程的理论基础及发展史 转化实验 基因工程的理论基础及发展史 当时很多人对这一结果表示怀疑，其中包括后来为转化因子的确定作出突破性贡献的美国科学家埃弗里（Oswald Theodore Avery)。 后来，埃弗里实验室里的其他科学家通过实验证实了格里菲斯的发现，才使埃弗里相信了这一事实。 基因工程的理论基础及发展史 他们进行了更加深入的研究，发现在试管里也可以完成转化过程。这说明这种转化与小鼠无关。 进一步的研究还表明，加热杀死的光滑型细菌破碎后得到的不含完整细胞的破碎液也可以使粗糙型细菌转化成致病的光滑型细菌，这就说明一定是光滑型细菌中的某一种在加热过程中没有被