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                该课件由【语文公社】友情提供 考点·全线突破 考点一 DNA的粗提取与分离 [关键点击] 1.DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度  2.鉴定方法  (1)DNA与二苯胺在沸水浴条件下反应呈蓝色; (2)蛋白质与双缩脲试剂常温下反应呈紫色。 3.DNA粗提取实验材料和方法的选择 (1)不同生物的组织中DNA含量不同 在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。   (2)材料不同所采用的提取方法不同 ①植物组织:取材→研磨→过滤→沉淀。 ②鸡血:制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA。 4.DNA粗提取实验中注意的问题 (1)DNA的粗提取的关键:提取DNA时DNA和蛋白质的溶解与析出是相反的,实验时一定要明确DNA分子的去向,防止误将DNA分子丢弃。 (2)2次加蒸馏水的作用:①加入鸡血细胞液,使血细胞吸水涨破;②加入含DNA的2 mol/L NaCl溶液,使其稀释,从而析出DNA。  (3)3次使用纱布的作用:①过滤血细胞破裂液,提取细胞核物质(DNA在滤液中);②过滤0.14 mol/L NaCl溶液,滤出DNA(DNA在黏稠物中);③过滤溶有DNA的2 mol/L NaCl溶液(DNA在滤液中)。 (4)3次使用NaCl溶液的作用:①2 mol/L NaCl溶液,溶解提取细胞核物质;②0.14 mol/L NaCl溶液,使DNA析出;③2 mol/L NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物。 考点二  PCR技术的基本操作和应用 [关键点击] 1.PCR相关技术原理与条件  (1)PCR:多聚酶链式反应的简称,是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。 (2)引物:是一小段RNA或单链DNA,它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。 (3)扩增方向:DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 2.细胞内DNA复制与PCR技术 3.PCR的反应过程 (1)变性:当温度上升到90 ℃以上时,双链DNA解聚为单链,如下图: (2)复性:温度下降到50 ℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,如下图:   (3)延伸:温度上升到72 ℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,如下图: 考点三 血红蛋白的提取和分离 [关键点击] 1.常用的蛋白质分离方法 (1)凝胶色谱法  (2)电泳法原理: ①在一定pH下,蛋白质分子的某些基团解离后带上正电或负电,在电场的作用下,带电分子会向着与所带电荷相反的电极移动。 ②由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。 2.分离DNA和蛋白质比较 考点四 植物有效成分的提取 [关键点击] 1.三种提取方法 2.三种植物有效成分提取 考情·随堂体验 考情一 DNA的粗提取与分离 1.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是(  ) A.利用DNA溶于酒精,而蛋白质不溶于酒精,可将DNA与蛋白质分离 B.利用高温能使蛋白质变性,却对DNA没有影响的特性,可将DNA与蛋白质分离 C.在溶有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤,取滤液进行以后的实验 D.在DNA滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将DNA与蛋白质分离  解析 利用DNA不溶于酒精,而蛋白质溶于酒精,可将DNA和蛋白质分开。温度过高也会影响DNA的特性,如PCR技术。在物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液中DNA溶解度最大,但加入蒸馏水后,DNA溶解度降低,DNA析出,过滤后应取其黏稠物进行以后的实验。蛋白酶能分解蛋白质,而不能分解DNA。 答案 D  2.下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是(  ) A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D.用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少 解析 提取植物细胞中DNA时加入洗涤剂可瓦解植物细胞膜,利于DNA的释放,但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度,A项错误;含DNA的丝状物应先溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,再加入二苯胺试剂在沸水浴条件下检测,冷却后变成蓝色,B项错误;菜花匀浆中含有DNA水解酶,常温下其活性较高,可催化DNA水解从而影响DNA的提取,C项正确;用玻棒缓慢搅拌滤液不使DNA分子断裂,就不会影响DNA的提取量,D项错误。 答案 C 考情二 PCR技术的基本操作和应用 3.复旦大学的研究人员正在进行一项利用DNA技术在全国曹姓家族中寻找曹
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