李芳-重组梅毒螺旋体抗原tpn17纯化及基于金磁微粒梅毒螺旋体抗体的检测西北大学硕士学位答辩20075.ppt

梅毒（Syphilis） 是一种由梅毒螺旋体（Treponema pallidum, Tp）引起的性传 染病，发病率逐年递增 。因此，梅毒已经成为一个严重的公共 卫生问题。 检测方法 梅毒螺旋体检测方法比较 金磁微粒概述 应用金磁微粒检测梅毒螺旋体抗体示意图 研究内容及意义 运用阳离子交换层析纯化梅毒螺旋体抗原Tp17并对其进行 HRP 标记，以双抗原夹心法测定纯化及标记抗原的滴度 以金磁微粒为固相载体，建立检测血液中梅毒螺旋体抗体的 方法，为将金磁微粒应用于临床检验提供实验依据 实验一:重组梅毒螺旋体抗原Tp17的纯化 应用CM介质对抗原进行纯化研究 纯化抗原的标记及其滴度测定 重组梅毒螺旋体抗原Tp17的纯化 重组梅毒螺旋体抗原Tp17的表达 Tp17抗原最佳 (NH4)2SO4沉淀饱和度的确定 离子交换层析条件的选择与样品的预处理 SDS分析纯化结果 纯化抗原的浓度测定 纯化抗原的标记及其滴度测定 重组梅毒螺旋体抗原Tp17的表达 Tp17抗原最佳(NH4)2SO4沉淀浓度 层析系统的选择 选择CM高流速琼脂糖微球（CM Bio-Sep FF，pH工作范围： 6-10）作为纯化蛋白的层析介质，对上样缓冲液pH值及洗脱缓冲液离子强度进行了确定 SDS