第3章酶-2015-3-8.ppt

底物(substrate, S)：酶作用的物质。 产物(product, P)：反应生成的物质。 酶促反应：酶催化的反应。 酶活性：酶催化化学反应的能力。 公元前两千多年，我国已有酿酒记载。 一百余年前，Pasteur认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。 1878年，Kühne首次提出Enzyme一词。 1897年，Eduard Buchner用不含细胞的酵母提取液，实现了发酵。 1926年，Sumner首次从刀豆中提纯脲酶。 1982年，Cech首次发现RNA也具有酶的催化活性，提出核酶(ribozyme)的概念。 1995年，Jack W.Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性DNA片段，称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。 金属离子是最多见的辅助因子 一些金属酶和金属激活酶类 金属酶 金属离子 金属激活酶 金属离子 碳酸酐酶 Zn2+ 柠檬酸合成酶 K+ 羧基肽酶 Zn2+ 丙酮酸激酶 K+ Mg2+ 过氧化物酶 Fe2+ 丙酮酸羧化酶 Mn2+ Zn2+过氧化氢酶 Fe2+ 精氨酸酶 Mn2+ 己糖激酶 Mg2+ 磷酸水解酶类 Mg2+磷酸转移酶 Mg2+ 蛋白激酶 Mg2+，Mn2+ 锰超氧化物歧化酶 Mn2+ 磷脂酶C Ca2+谷胱甘肽过氧化物酶 Se 磷脂酶A2 Ca2+ 二、酶的活性中心active center 活性中心内的必需基团 三、同工酶isoenzyme 　 二、酶通过促进底物形成过渡态而提高反应速率 诱导契合作用 不同因素对酶促反应的影响 中间产物学说 ES的生成速率 = ES的分解速率 (二)Km与Vm是有意义的酶促反应动力学参数 Km值的推导 Km与Vmax的意义 双倒数作图,又称林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法 温度对淀粉酶活性的影响 酶的最适温度不是酶的特征性常数，它与反应进行的时间有关。 低温的应用？ 酶的活性虽然随温度的下降而降低，但低温一般不使酶破坏。温度回升后，酶又恢复其活性。 酶的抑制剂(inhibitor) (一) 不可逆性抑制作用 （二） 可逆性抑制作用 2、非竞争性抑制作用 六、激活剂可加快酶促反应速率 必需激活剂 (essential activator) 非必需激活剂 (non-essential activator) 变构效应剂 (allosteric effector) 　 2、化学修饰调节 在其他酶的催化作用下，某些酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合，从而改变酶的活性，此过程称为共价修饰。 　 瀑布效应 二、 酶含量的调节包括对酶合成与分解速率的调节 诱导作用(induction) 阻遏作用(repression) （二）酶降解调控与蛋白质降解途径相同 溶酶体蛋白酶降解途径（不依赖ATP的降解途径） 非溶酶体蛋白酶降解途径（又称依赖ATP和泛素的降解途径） 一、酶可根据其催化的反应类型予以分类 二、每一种酶均有其系统名称和推荐名称 系统名称 (systematic name) 推荐名称 (recommended name) 有些疾病的发病机理直接或间接和酶的异常或酶活性受到抑制相关。 许多疾病也可引起酶的异常，这种异常又使病情加重。 激素代谢障碍或维生素缺乏可引起某些酶的异常。 酶活性受到抑制多见于中毒性疾病。 2、酶的测定有助于对许多疾病的诊断 血清酶对某些疾病的诊断具有更重要的价值 3、酶和某些疾病的治疗关系密切 2．酶标记测定法是酶学与免疫学相结合的一种测定方法 3．工具酶广泛地应用于分子克隆领域 分子克隆常用的工具酶 限制性核酸内切酶 DNA聚合酶Ⅰ 逆转录酶 T4DNA连接酶 碱性磷酸酶 末端转移酶 Taq DNA聚合酶 三、酶工程 酶分子工程主要是利用物理、化学或分子生物学方法对酶分子进行改造，包括对酶分子中功能基团进行化学修饰、酶的固定化、抗体酶等等，以适应医药业、工业、农业等的某种需要。 1、固定化酶是固相酶 固定化酶（immobilized enzyme）是将水溶性酶经物理或化学方法处理后，成为