论文—基因工程课程综合实验 转基因斑马鱼的构建.doc

《基因工程》课程综合实验---转基因斑马鱼的构建 实 施 方 案 《基因工程》课程综合实验教学在专业培养目标中的定位与目标 《基因工程》是生命科学学院等各专业的专业主干课，在这些专业的本科生教学计划中占有极为重要的地位。《基因工程》也是我们学校基地班和生技专业的专业必修课，已经有10余年的开课历史。全国其他高等综合院校都十分重视《基因工程》课程建设，绝大多数院校都将《基因工程》作为学校精品课程进行建设。湖南师范大学大学在《基因工程》教学和研究方面具有坚实的基础， 2008年《基因工程》建设成为了湖南省精品课程，从而为我校《基因工程》的教学改革提供了契机。 基因工程是以遗传学为理论基础的一门实践性很强的学科，是生物学科中一门体系还欠完整却发展十分迅速的学科，对探索生命的本质、推动整个生物学科的发展起着巨大的作用；同时又是一门紧密联系生产实际的实验科学，对新品种选育和良种繁育、遗传疾病防治等都具有重要的应用价值。通过《基因工程》的学习，使学生掌握基因工程的基本原理、基本方法和最新发展动态；通过《基因工程》课程综合实验教学，使学生熟悉基因工程的基本操作方法，注重对学生的实验操作技能的培养。 基因工程课程综合实验---转基因斑马鱼的构建教学大纲 课程名称： 基因工程（实践课程部分） 课程编号： 面向专业： 生物技术、生物科学、基地班 课程总学时：理论51学时，实验34学时_ 实验学时：34_ 课程学分： 理论3学分，实践2学分 一、实验目的 本课程的教学目的是让学生对基因工程技术所涉及的主要环节的基本原理和基本技术进行系统地学习和掌握，培养学生基因工程基本实验操作、实验设计、实验结果分析和创新实验能力，通过基因工程综合实验的开设，注重学生综合素质和实践能力的培养。 二、实验内容、学时分配与组织 序号 实验项目名 称 内 容 提 要 实验性质 实验类型 学时分配 每组人数 备注 1 目的基因的获取与重组载体的构建 1．以pEGFP-C2为载体，组织特异启动子为供体DNA，进行连接。 2．感受态细胞的制备； 4．重组子转化的鉴定 专业基础 ? 9 4 必做 2 质粒的提取与重组子的鉴定 1．质粒的小量提取 2．限制性核酸内切酶进行酶切鉴定 3．PCR鉴定 专业基础 ? 8 4 必做 3 重组载体的线性化和受体系统的获得 1．表达质粒的大量制备 2．表达质粒的线性化及回收纯化 3．鱼受精卵的获得及培养 专业基础 ?提高型 5 4 必做 4 显微注射及转基因表型分析 1 1. 显微注射制备转基因鱼 2. 转基因鱼的表型鉴定 3、转基因鱼纯合子的获得 综合 提高型（综合型） 12 4 必做 三、教学管理模式与注意事项 1．学生在实验前必须认真复习课程有关内容，预习实验指导书。 2．指导教师适当讲解相关理论及注意事项，提示具体的实验方法和操作，演示重要仪器的使用。 3．实验小组人数为4人，由学生独立操作。每个实验的时间根据实验流程本身决定，长短不一，但需要集中的时间。 4．要求学生掌握基本的操作方法，如实逐项记录数据，独立完成实验报告，并当天上交。 四、成绩评定与占课程总成绩的比例 1．指导教师对实验报告应认真批改，记录每一次的实验成绩。 2．根据平时实验操作成绩，给出实验操作考试成绩，以占课程总成绩30%的比例纳入课程的总成绩。 五、设备与器材配置（每组） 1．试管、试管架、可调式微量加样器等； 2．电泳仪、电泳槽、染色缸；42℃ 3．恒温振荡箱，超静工作台。 4．手动显微注射器、体式显微镜，硼硅酸玻璃毛细管。 5．倒置显微镜、摄像系统（CCD），发圈。 6．自动水循环系统一套，孵化水槽。 六、实验指导与参考资料 1．基因工程实验指导，转基因斑马鱼的构建，湖南师范大学生命科学院遗传与发育生物学系自编，，2009年 2. 盛小禹. 基因工程实验技术教程 复旦大学出版社。 3．彭秀玲.袁汉英.谢毅.王洪海. 基因工程实验技术 湖南科学技术出版社。 《基因工程》课程综合实验教学可行性分析 一、转基因动物简介 转基因动物（transgenic animal）是指动物所有细胞基因组中整合有外源基因的一类动物，具有将外源基因遗传给子代的能力，整入动物基因的外源基因被称为转基因（transgene）。转基因动物技术是常规分子生物学技术的延伸和拓展，它不仅为人们研究生命科学提供了一个更有效的工具，转基因技术是生物学领域最新重大进展之一，已能渗透到生物学、医学、畜牧学等学科的广泛领域。转基因动物已成为探讨基因调控机理、致癌基因作用和免疫系统反应的有力工具。同时人类遗传病的转基因动物模型的建立，为遗传病的基因治疗打下坚实的理论和实验基础。转基因技术涉及外源基因的组建、载体、受体、基因导入技术、供 HYPER