[生物学]组织切片技术123456章.docVIP

第一章 实验室基本设备及常用试剂 一、基本设备 组织学实验室的常用设备，主要有观察组织标本用的显微镜及制作标本用的必要设备、工具等。 （一）显微镜 显微镜是观察组织结构的精密仪器。显微镜的种类很多，功能也各不相同：如相差、荧光、偏振光、倒置及暗视野显微镜等，电子显微镜更给组织学研究开辟了广阔领域。本章侧重介绍常用和透射光学显微镜的简单结构和光学部分。 1.显微镜的结构 显微镜包括机械部分和光学部分。 (1)机械部分 1)镜座及镜柱 是支持和稳定整个镜体的主要部件，一般多用铸铁铸成。近年来多改用生铝铸造镜座，功能虽同，但其质轻不稳则不如较重的铸铁。 2)镜臂 连在镜柱上短的弯曲部分，提取或移动显微镜时的把握处。镜臂与镜柱间有活动关节（倾斜关节），可使显微镜向后做一定的倾斜，便于观察时镜筒角度适应座位的高低，但其倾斜角度不会使镜的重心偏移至稳定范围之外。 3)载物台 为安置标本的平面台，呈方形或圆形，台的中心有一圆孔，可通过光线。台上附有一对弹簧夹，以夹持切片；或装有带刻度的推片器移动切片。 4)镜筒 附于镜臂上端前方的圆筒，长度一般为160mm。它是成像元柱的通道，镜筒上端装接目镜，下端装物镜转换器。 5)物镜转换器 简称转换器，接镜筒下端，为圆盘状，有3～4个物镜孔。装物镜于转换器时，低倍、高倍至油镜依次以顺时针方向安装，便于使用。物镜孔的螺纹和口径是国际统一的，可换用任何国家生产的物镜。 6)调焦轮 又称调焦螺旋。调焦轮有两组，即粗调焦论和细调焦轮。旋转它们时，有的是调动镜筒，有的是调动载物台，调节焦距使物象清晰。粗调焦论调节范围较大，每转动一周可使镜筒或载物台升降10mm左右。细调焦论调节范围较小，每一周，镜筒或载物台上仅有0.1或0.2的升降。 (2)光学部分 1)接目镜（目镜），装在镜筒上端，其表面标有放大率5×（5倍）10×（10倍）、16×（16倍）、20×（20倍）、甚至25×（25倍），近年各厂家生产的目镜多为平周（刻有P或Plan等字样），光视野（刻有WF）等。 2)接物镜（物镜），装在镜筒下端的转换器上，一般有10×、40×及油浸镜（90～100×）等数种。10×以下为低倍镜，40×左右为高倍镜。一般常用的时消色差（Achromalic）物镜。还有较高级的复消色差（Apochromatic）物镜，成像质量更高，需要配合补偿目镜（Comensating）使用，但此类物镜质量很高，一般实验室不必购置。像的放大率×物镜放大率。 3)聚光器，装载载物台之下，它聚集反光镜所反射的光线，通过载物台的中央空透过标本。聚光器也有调节螺旋，可使之在一定距离内升降，从而调节光线进入物镜的聚散程度，有助于调节成像的景深。但当用油浸物镜时，聚光器必须开至顶端。聚光器内附有虹彩光阑，能随意开大或缩小以调节光线的强弱。显微镜在使用前必须先调好聚光器，一般都调整夹持聚光器的螺丝钉。使聚光器的上平面恰好与载物台平面相齐。此外，它也附有装色片的片框。 4)反光镜，为聚光器下方的圆镜，一面是平镜，另一面是凹镜。凹面在光线暗而弱时使用。 2.显微镜的作用 (1))安放显微镜 显微镜自镜箱中取出时，右手持镜臂，左手托镜座，轻放在实验台上，靠近自己身体前略偏左侧。距实验台的边缘不要太近以免掉落。 (2)调焦 转动粗调焦论使镜筒略微上升，先降低倍镜转到位，用左眼注视目镜，依次调节反光镜、聚光器和光栏，至视野的光度适宜为止。 将玻片标本放置载物台上，正对载物台上的圆孔，注意使有标本的一面朝上，转用低倍物镜，一面用左眼（不要闭上右眼）在目镜中观察一面用左手移动标本，用右手转动粗调节轮，直至找到观察目标并调节成像清晰为止。低倍镜视野较大，成像倍数低，观察时便与了解标本的全面情况。如要观察标本中某一部分的细微结构，则需用高倍镜。此时，将要看的部分移至视野正中，再转换高倍镜，一般显微镜如已调好低倍镜，只要转换高倍镜，焦点即已调整得相当完好 ，此时，只使用细调焦轮调焦既可。 油浸镜在观察更微细的结构时使用。使用时要先在玻片上加油剂（专供油镜用的香柏油或其他合成剂），将有镜转到位后，慢慢调至油镜的下镜片正浸入油剂为止。用细调节轮调焦。观察完毕后用擦镜纸沾二甲苯将有镜内影响镜片的牢固度。 (3)收藏显微镜 显微镜使用完后，应将显微镜各部件还原并放入境箱中保存。 3.注意事项 显微镜是一种结构精密的仪器，在使用时必须十分小心。 (1)一般在显微镜箱内放置防潮矽胶，定时更换以保持干燥，防止光学部分长霉及金属部分生锈。较高级显微镜的目、物镜长期不用时，应取下并保存于干燥器内。显微镜的光学部分，不可用手指、粗毛巾或纱布擦拭，必须用擦镜纸或绸布、绒布轻轻拂拭。其机械部分可以用纱布擦拭。 (2)显微镜不得暴露于日光下，避免