[自然科学]分析化学第十章.ppt

第10章 吸光光度法 10.1 概述 10.2 吸光光度法基本原理 10.3 分光光度计 10.4 显色反应及影响因素 10.5 光度分析法的设计 10.6 吸光光度法的误差 10.7 常用的吸光光度法 10.8 吸光光度法的应用 10.1 概述 吸收光谱 发射光谱 散射光谱 吸光光度法 吸光光度法 是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，包括比色法、可见及紫外吸光光度法及红外光谱法等。 10.2 吸光光度法基本原理 1 吸收光谱产生的原因 光:一种电磁波,波粒二象性 吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小 A～l关系 最大吸收波长 lmax：光吸收最大处的波长 4 朗伯-比尔定律 第二节 光吸收的基本定律 灵敏度表示方法 摩尔吸光系数 e ε的含义 吸光度的加和性 1 分光光度计的组成 单波长单光束分光光度计 常用光源 单色器 作用:产生单色光 常用的单色器：棱镜和光栅 检测器 作用：接收透射光，并将光信号转化为电信号 常用检测器： 光电管 光电倍增管 光二极管阵列 要求： a. 选择性好 b. 灵敏度高 (ε104) c. 产物的化学组成稳定 d. 化学性质稳定 e. 反应物和产物有明显的颜色差别 (?l60nm) 金属螯合物应用于光度分析中的优点： 1.大部分金属螯合物都呈现鲜明的颜色，摩尔吸光系数大于104，因而测定的灵敏度很高； 2.金属螯合物都很稳定，一般离解常数都很小，而且能抗辐射； 3.专一性或特征性较强，绝大多数有机整合剂，在一定条件下，只与少数或其一种金属离子络合，而且同一种有机螯合剂与不同的金属离子络合时，生成具有特征颜色的螯合物。 4.虽然大部分金属螯合物难溶于水，但可被萃取到有机溶剂中，大大发展了萃取光度法。 5.在显色分子中，金属所占的比率很低，提高了测定的灵敏度。因此，有机显色剂是光度分析中应用最多最广的显色剂，寻找高选择性、高灵敏度的有机显色剂，是光度分析发展和研究的重要内容。 生色团：凡是包含有共轭双键的基团如—N＝N—、—N＝O、—NO2、对醌基、＝C＝O(羰基)、＝C＝S(硫羰基)等，一般都具有颜色，原因是这些基团中的л电子被光激发时，只需要较小的能量，能吸收波长大于200nm的光。 助色团：某些含有未共用电子对的基团如胺基—NH2，RHN—，R2N—，羟基-OH，以及卤代基—F等，它们与生色基团上的不饱和键互相作用，引起永久性的电荷移动，从而减小了分子的活化能促使试剂对光的最大吸收“红移” (向长波方向移动)，使试剂颜色加深，这些基团称为助色团。 示差吸光光度法的误差 因为在示差法中，△A∝△C，所以仪器测量所造成的浓度误差应为△C的百分之几，而△C仅是绝对浓度的很小部分，所以使绝对浓度的测量准确度大大提高。 例： 即：△C仅占CX的1/10。 若在适宜范围内读数，其误差为5%，则绝对浓度造成的测量相对误差仅0.5%。 示差法之所以能提高测定结果的准确度，实质上是充分地利用了仪器的灵敏度，扩大了读数标尺的结果。 如：一般光度法中CX的 示差法中CS的 ，若调至 则此时： （相当于标尺扩大了10倍） 相应地 （在误差较小区域内）即：若浓度测量误差为X%，则 —— 较大； —— 较小。 在示差法中，作参比的标液浓度CS越接近Cx越好，因为CS↑，AS↑，测量相对误差↓。 此法不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色光(λ1和λ2)；以参比波长λ1处的吸光度Aλ1作为参比，来消除干扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。 1. 原理  ΔＡ＝A λ2 －A λ1 ＝（ελ2 －ελ1 ) b