[自然科学]第五章-发酵工艺控制.ppt

第七章 发酵工艺的控制 一、概述 二、发酵工艺控制的目的与方法 三、温度对发酵过程的影响及其控制 四、pH值对发酵过程的影响及其控制 五、溶解氧对发酵过程的影响及其控制 六、泡沫对发酵过程的影响及其控制 七、发酵终点的判断 一、发酵过程工艺控制的目的 维持菌种最佳发酵条件，得到最大的比生产速率和最大的生产率，使菌种的代谢潜能得以发挥。 从菌种内在特点上满足： 生长速率、呼吸强度、营养要求（酶系统）、代谢速率等； 从菌种外部环境上控制： 温度、pH、溶氧浓度、渗透压、离子强度、剪切力等。 二、发酵过程的中间分析 中间分析是工艺控制的眼睛，从分析的代谢参数来判断发酵过程中微生物的主要代谢变化。 代谢参数又称为状态参数，它们反映发酵过程中菌的生理代谢状况. 如pH，溶氧，尾气氧，尾气二氧化碳，粘度，菌浓度等 按性质分可分三类： 物理参数：温度、搅拌转速、空气压力、空气流量、溶解氧、表观粘度、排气氧（二氧化碳）浓度等。 化学参数：基质浓度（包括糖、氮、磷）、pH、产物浓度、核酸量等。 生物参数：菌丝形态、菌浓度、菌体比生长速率、呼吸强度、基质消耗速率、关键酶活力等。 1、发酵参数类型 从检测手段可分为：直接参数、间接参数 直接参数：通过仪器或其它分析手段可以测得的参数，如温度、pH、残糖等。 指取出样后测定得到的参数，如残糖、 NH2-N、菌体浓度。 间接参数：将直接参数经过计算得到的参数，如摄氧率、KLa等。 直接参数 在线检测参数 离线检测参数 指不经取样直接从发酵罐上安装的仪表上 得到的参数，如温度、pH、搅拌转速； （1）糖含量 糖的消耗：反映产生菌的生长繁殖情况；反映产物合成的活力。 糖含量测定包括总糖和还原糖。 总糖指发酵液中残留的各种糖的总量。如发酵中的淀粉、饴糖、单糖等各种糖。 还原糖指含有自由醛基的单糖，通常指的是葡萄糖。 2、几种重要发酵参数 （2）氨基氮和氨氮 氨基氮指有机氮中的氮（NH2-N），单位是 mg/100ml。 氨氮指无机氨中的氮（NH3-N）。 氮利用快慢可分析出菌体生长情况，含氮产物合成情况。 氮源太多会促使菌体大量生长。有些产物合成受到过量铵离子的抑制。通过氨基氮和氨氮的分析可控制发酵过程。 发酵后期氨基氮回升时要适时放罐，否则影响提取过程。 （3）菌浓度和菌形态 直接反映菌生长的情况。 菌形态：显微镜观察。 菌浓度的测定是衡量产生菌在整个培养过程中菌体量的变化，一般前期菌浓增长很快，中期菌浓基本恒定。补料会引起菌浓的波动，这也是衡量补料量适合与否的一个参数。 菌浓测定方法 测粘度 压缩体积法（离心） 静置沉降体积法 光密度测定法 OD600~660 适合于细菌、酵母 （4）产物浓度 产物浓度直接反映了生产的状况,是发酵控制的重要参数。 产物量 的测定 ①效价表示法 有效成分的多少，大小用单位（U）来表示 重量折算单位：以最低抑菌浓度为一个单位， 如青霉素0.6微克＝1U 重量单位：规定某些抗生素活性部分1μg=1u 如链霉素、 卡那霉素、红霉素等定义活性部分1μg＝1u 类似重量单位：规定抗生素的某种盐1mg=1000u如金霉素、 四环素的盐酸盐定一为1μg＝1u ②酶活力的表示法 酶活力用单位来表示。由于酶通常不是很纯，不能用重量来表示酶的量。 ③浓度表示法 （一）温度对发酵过程的影响及其控制 1、温度对发酵的影响 （1）温度对微生物细胞生长的影响； （2）温度对产物形成的影响； （3）温度影响发酵液的理化性质； （4）温度影响生物合成的方向（影响代谢途径方向）； （5）温度对酶的影响。 三、发酵过程重要参数的控制 温度对微生物细胞生长的影响 举例： ●大肠杆菌最适生长温度为37℃； ●毕赤酵母最适生长温度为30℃ ●谷氨酸发酵中，生产菌最适生长温度为30~34℃ ●乳酸链球菌最适生长温度34℃ 温度对产物形成的影响 举例：以青霉素为例，通过考察13℃~35℃对青霉素的生长速率，呼吸强度和青霉素合成速率影响，结果是温度对着三种代谢影响不同。青霉素代谢能如下： 青霉菌生长活化能E＝34kJ/mol； 青霉菌呼吸E＝71kJ/mol； 青霉素合成E＝112kJ/mol。 从以上数据分析，青霉素合成速率对温度反应最敏感。 温度影响发酵液的理化性质 黏度、基质和氧在发酵液中的溶解度、传递速率、某些基质的分解和吸收速率等。 温度影响生物合成的方向（影响代谢途径方向） 举例：以金色链丝菌发酵同时产四环素和金酶素为例： 30℃：合成金霉素较强 30～35℃：合成四环素增强 3