基因组合成质量评价要求标准编制说明.PDFVIP

《基因组合成质量评价要求》 标准编制说明 一、 任务简况 该标准由深圳华大基因科技有限公司负责起草，协作单位包括广东省标准化研究院、广 东产品质量监督检验研究院、深圳华大基因研究院。 二、目的及意义 基因合成是用人工方法合成基因的技术，是基因获取的手段之一，相对于从已有生物中 获取基因来说，基因合成无需模板，因而不受基因来源限制。通过基因合成，可以获得自然 界中不存在的基因，为人类改造生物开辟了一个全新的方向，在可预计的将来，基因合成将 在生命科学领域发挥巨大作用，在新能源、新材料、人工生命、核酸疫苗、生物医药等领域 的作用已初步体现。 随着合成生物学的快速发展，市场对基因合成的需求也越来越高。国内外绝大多数具备 DNA 合成能力的公司都已开展了基因合成服务。但是由于技术条件的限制，生产过程中各个 环节产品质量控制的缺乏或不统一，导致最终交付的产品质量水平参差不齐，在这方面，国 内企业表现的尤为突出。综合比较分析几家成功进入中国的外企的产品说明书发现，虽然无 基因合成质量的国际标准可遵照，但其出具的质量检测报告所含检测指标要多于国内企业， 检测要求也更严格，再结合以低廉的价格和较短的交货时间，这三点优势助其抢占了国内大 部分基因合成的市场份额。 经过调查发现，由于国内没有制定有关基因合成产品质量检测的标准，公司入行门槛低， 产品质量的无保证直接拉低了国企的竞争力，同时也造成了行业的混乱无序。因此十分有必 要建立一套质量评价系统应用于基因合成行业。 本标准从产品质量检测方法和合格评价指标两个方面给予了系统规范，其中所使用的技 术为本校准制定单位多年生产经验总结，而指标范围的制定实为凝练国内外的产品检测指标 而成，且已经过本单位测试其实用性和可实施性，因此本标准可在全国范围内开展实施。 本标准若经批准实施，将有利于规范整个行业市场，确保企业产品质量，从而提升客户 满意度和安全性，进而有助于国内企业突破外企包围圈，对我国基因合成产业的跨越式发展 起到了至关重要的推动作用。 三、遵循原则和编制依据 本标准遵循“针对性、先进性、实用性、统一性、规范性”的原则，严格按照GB/T 1.1-2000 的要求编写。 四、主要内容和相关说明 本标准的制定主要参考并引用现有标准《GB/T 19495.1 转基因产品检测 通用要求和定 义》、《GB/T 19495.2 转基因产品检测 实验室技术要求》、《GB/T 9721 化学试剂 分子吸收 分光光度法通则(紫外和可见光部分)》、《GB3102.6 光及有关电磁辐射的量和单位》、《GB/T 14666 分析化学术语》、《SN/T 2497.21 进出口危险化学品安全试验方法 第21 部分：琼脂 糖凝胶电泳试验》、《QB/T 4497 具有深冷功能的家用制冷器具》、《YY/T 0087 电泳装置》、 《YY/T 0657 医用离心机》、《JB/T 6777 紫外可见分光光度计》。 本标准规定了人工合成方法获得的基因产品的质量检测指标、检测操作规程、操作环境 要求、检测报告要求，同时规定了样品保存要求。本标准适用于人工合成基因产品质量评价 及其检测试验的操作。 主要内容： 一、对人工合成的DNA 质量应符合的基本要求： 1，DNA 纯度和总量：合成的DNA 用TE 溶液溶解后，测得OD260/OD280 的比值应为1.8～ 2.0，如果比值低于 1.8，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质的污染，需要纯化样品； OD260/OD230≥2.0，比值小于 2.0 标明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染， 需要纯化样品。此项要求是规定了人工合成的DNA 产品的纯度的最佳指标。 DNA 总量需大于或等于定制需求，计算公式为：DNA 总量=DNA 测得浓度×稀释倍数×溶 液总体积。 核酸在波长 260 nm 处有最高吸收峰。蛋白质由于含有芳香氨基酸，因此也能吸收紫外 光。通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处，在260nm处的吸收值为核酸的十分之一或更低， 故核酸样品中蛋白质含量较低时对核酸的紫外测定影响不大。230nm 是碳水化合物最高吸收 峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估。 基于分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定 的准确度和精确度。为确保测量值的准确性和有效性，测量前应： （1）使用pH 值一定、离子浓度较低的缓冲液（