第九章 色谱法概论(全部)精选.pptVIP

注意三点： ① 分配比是组分在两相中的总量之比，而不是浓度之比，此量可以是重量数，也可以是摩尔数等。 ② VS 系指真正参与组分在两相之间分配的那一部分有效体积，在不同的色谱体系中含义不同: 分配色谱——指固定液的体积 吸附色谱——吸附剂表面积 离子交换色谱——交换剂的交换容量 凝胶色谱——多孔固定相的孔容 ③ 分配系数与分配比的区别 分配系数只决定于组分和两相的性质，与两相体积无关，而分配比不仅决定于其性质，且与两相体积有关，所有的组分的分配比均随固定相的量而变化。 * 3、K、K’与组分迁移速度的关系 定性讨论：若组分的K大，则组分在固定相中分配的量多，即固定相对其保留能力强，移动速度应该慢；反之，保留能力弱。 定量讨论：K与保留时间的关系 因为 R = tm / tR = Nm / N总 Nm：流动相中组分的分子数； Ns：固定相中组分的分子数 ； N总：组分的分子总数 tm 占tR 的比例越大，则分子花在流动相中的时间比例越大，移动越快；即分子在流动相中停留的时间越多，则移动越快。 从分子总数来讨论：R = Nm / N总 组分在流动相中分子数占总分子数的比例越大，则组分移动越快，即组分在流动相中分子数越多，分子停留在流动相中的时间就越多。 * 所以 R = tm / tR = Nm / N总 = Nm / (Nm+Ns） = tm / (tm+ tR’) = CmVm /（CmVm + CsVs） =1 /（1+CsVs / CmVm） =1 /（1+KVs / Vm） =1 /（1+ K’） 所以 tR = tm（1+KVs /Vm） = tm（1+ K’ ） ——保留方程 所以 K’= t R’ / tm 若将 tR = tm（1+ K’） = tm（1+KVs /Vm） 两边统乘以流量（ml/min）（体积流量） 则 VR = Vm（1+ K’） = Vm+KVs ——基本保留方程 * 4、保留方程讨论 （1）K、K’越大，tR 越大，组分移动速度越慢， 所以组分的迁移速度由组分的分配系数(比)决定。 （2）K、K’ = 0时，组分不被固定相所滞留，此时 tR = tm ，即为非滞留组分； K、K’→∞时，tR→∞，组分强烈滞留，无法洗脱； 所以 K 一般在 1~10 之间为宜。 （3）两组分要得以分离，则tR1 ≠tR2，即K1≠K2，K1’≠K2’，即它们的分配系数、分配比必须有差异。 * （4）tR = tm + tmK’ 即tR’ =tmK’ 所以组分在固定相上的停留时间取决于分配比。 保留方程的色谱意义： 一个组分出柱所需要的时间由两部分组成：tm、tmK’，tm表示组分必须随流动相一起移动同样的时间才能出柱，即死时间。 tmK’表示组分从两相界面进入固定相进行分配，然后再返回两相界面所用的时间，即组分保留在固定相中的时间，它决定于组分的分配比。 这说明，tm、Vm不反映组分在两相之间的分配行为，它对任何组分都是相同的，真正反是映分配行为的是tR’、 VR’。 * （5）因为 tR’=tmK’ VR’=VmK’ 所以 α2,1 = tR2’ / tR1’ = K2’ / K1’ = K2 / K1 即α2,1只与温度、两相的性质有关，与柱长、柱径、流速、填充情况无关。 （6）保留值（tR 、VR、α2,1）是一种定性指标，可用于定性分析，因为K、K’与组分性质有关，相同组分在同一色谱条件下，其K、K’应相同，即（tR 、VR、