[农学]第七章 植物花药和花粉培养及单倍体育种.pptVIP

第七章　植物花药和花粉培养及单倍体育种 陈观水 生命科学学院 jimchen7909@163.com第七章 植物花药和花粉培养及单倍体育种 主要内容： 第一节 花药与花粉培养 第二节 单倍体育种 学习的目标与要求： 掌握花药培养和花粉培养技术，掌握花药和花粉培养在单倍体育种中的重要应用，了解我国单倍体育种成就。 具有进行花药培养和花粉培养的基本能力，具有单倍体育种认知，初步具备查阅资料收集信息基础能力。 植物花药和花粉培养及单倍体育种 植物花药和花粉培养及单倍体育种 一、花药与花粉培养 1.花药培养与花粉培养的概念及意义 花药培养(anther culture)：将发育到一定阶段的花药剥离下来(切去花丝部分)接种到培养基上进行培养，最终形成完整植株的过程 花粉培养(pollen culture)：又称小孢子培养(microspore culture)，或游离小孢子培养(isolated microspore culture)，是指在无菌条件下，将花粉从花药中游离出来，使其分散或游离态，发育成单倍体植株的过程。 一、花药与花粉培养 一、花药与花粉培养 1.花药培养与花粉培养的概念及意义 两者之间的异同： 培养目的相同，均获得小孢子植株。 花药培养其外植体是植物雄性生殖器官的一部分，就培养方法和技术来讲，属于器官培养；而花粉培养属于细胞培养。 花粉培养没有药壁组织干扰；可计数小孢子产胚率；可观察雄核发育的全过程；单倍体产量高。但技术更复杂。 一、花药与花粉培养 1.花药培养与花粉培养的概念及意义 植物花药与花粉培养的意义 获得纯系材料进行单倍体育种，提高育种效率 利用获得的纯合二倍体材料进行植物遗传规律研究，为遗传育种提供依据，减少育种的盲目性； 克服远缘杂种的不育性，获得具有双亲优良特性的可育远缘杂种 利用在远缘杂交F1代花药培养中出现的混倍体和丰富的染色体变异材料进行基础性研究 一、花药与花粉培养 1.花药培养与花粉培养的概念及意义 常规育种需4-6年获得纯系，而小孢子培养仅需一年。 一、花药与花粉培养 2.花药培养 一、花药与花粉培养 2.花药培养 一、花药与花粉培养 2.花药培养 花药培养的基本程序是： 培养材料的选择－材料(花蕾)预处理—外植体消毒灭菌—接种培养—植株再生—诱导生根—单倍体植株的染色体加倍及驯化移栽 一、花药与花粉培养 2.花药培养 1)培养材料的选择 需注意以下问题： 材料的基因型 供体植株生长条件和生理状态 花粉发育时期：单核期,尤其是单核中、晚期(单核靠边期) 一、花药与花粉培养 2.花药培养 2)材料的预处理 预处理是小孢子培养成功的前提条件 预处理目的：是改变小孢子的发育方向，使尽可能多的小孢子从配子体发育途径转向孢子体发育途径（即成为具胚胎发生潜力的小孢子）。适当的预处理能使绿苗产量大量增加。 预处理方法：主要是对花药进行适度的逆境处理，包括低温、高温、化学物质、离心、射线等。 一、花药与花粉培养 2.花药培养 3)外植体消毒 4)接种 5)培养 6)植株再生 7)生根 8)驯化与移载 9)单倍体植株的染色体加倍 一、花药与花粉培养 2.花药培养 一、花药与花粉培养 2.花药培养 一、花药与花粉培养 一、花药与花粉培养 3.花粉培养 习惯上，把处于四分体到单核早期的花粉称小孢子。进入单核以后则称为花粉。 花粉培养成苗途径与花药培养比较: 相同点：胚状体成苗途径、愈伤组织再分化成苗途径 不同点：花粉培养：花粉分离收集及培养方式(需进行花粉的分离特殊的花粉诱导培养) 一、花药与花粉培养 3.花粉培养 花药有药壁(2n)、药隔(2n)、花粉(n)等，因此，再生植株有可能来自药壁(2n)、药隔(2n)、或起源于数个花粉(n)的嵌合体。 游离花粉粒培养，再生植株为纯合体。 一、花药与花粉培养 3.花粉培养 优点（与花药培养比）：a、花药培养容易受药壁、花丝、药隔等体细胞组织的影响，再生植株会出现不同倍性的个体，而分离的花粉培养可以克服这一不足。b、能更好调节控制核发育的各种因子，而且可以直接从单细胞开始观察整个雄核发育的过程，为研究雄核的生理生化等问题提供方便。c、原则上将，从花粉培养能得到更多的花粉植株。 一、花药与花粉培养 3.花粉培养 花粉分离收集：由于花粉包于花药内，必须将它们从花药中分离、收集