16-蛋白质的生物合成-6th.pptVIP

蛋白质生物合成 康英姿 天津医科大学生物化学与分子生物学研究室 教学目标及基本要求 掌握蛋白质合成体系的组成及各成分的主要作用 掌握原核生物蛋白质生物合成过程 掌握真核生物与原核生物蛋白质生物合成的异同 了解翻译后加工修饰 掌握分子病概念，了解常见的蛋白质合成阻断剂的作用机理 遗传信息的传递---中心法则 翻译的基本过程 蛋白质的合成体系 mRNA的作用： mRNA种类很多，分子大小不一。在各种RNA中， mRNA的寿命最短。翻译是通过遗传密码来实现的，是蛋白质生物合成的中心环节。 tRNA与tRNA-氨基酸：从最简单生物到人类，在蛋白质的生物合成中都使用同一套遗传密码。 核蛋白体 多种蛋白因子 mRNA的作用 mRNA带有从DNA转录来的遗传信息------碱基排列顺序。翻译就是将mRNA中的核苷酸顺序转变为蛋白质分子种氨基酸顺序的过程，即将四个字母的核苷酸文字翻译成20个字母的氨基酸文字。 mRNA分子上有启动信号及终止信号，三联密码子AUG表示启动，也代表蛋氨酸；而UAA、UGA、UAG表示终止。 启动信号是核蛋白体附着于mRNA的起点，也是翻译的起点；终止信号是核蛋白体附着于mRNA的终点，也是翻译的终点。 遗传密码的基本特点 密码的连续性（commalss）：是指两个密码子之间没有间隔碱基，三联密码的读取是连续的，直至翻译终止。 密码的简并性（degeneracy）：是指密码子上第三位碱基改变往往不影响氨基酸翻译。 密码的摆动性（wobble）：密码子与反密码子配对，有时会出现不遵从碱基配对规律的情况，称为遗传密码的摆动现象。 密码的通用性（universal）：不论高等或低等生物都共同拥有一套遗传密码，即遗传密码的通用性。 核蛋白体 核蛋白体是蛋白质合成的场所，有参与蛋白质合成的酶系和各种辅助因子。各种成分在核蛋白体中有一定的空间排列，以保障翻译过程能按一定程序进行。 核蛋白体有大小两个亚基组成，原核细胞与真核细胞中，各亚基的成分是不同的。核蛋白体的主要成分是rRNA。 每一条mRNA链可同时连接五、六个乃至五、六十个核蛋白体进行蛋白质合成，这种聚合物称为多核蛋白体。 核蛋白体的立体模式图 tRNA和氨基酰-tRNA tRNA的3’端具有同样的三个核苷酸序列，即-CCA，活化后的氨基酸与tRNA的3‘端核苷酸的核糖的2’或3’位羟基以酯键的形式结合，形成相应的氨基酰- tRNA。 各种tRNA上都有核蛋白体识别位点，以及特异的反密码子（anticode）与mRNA上的密码互补配对，使tRNA携带的氨基酸按一定顺序进入核蛋白体进行肽链合成。 密码子AUG既是蛋氨酸编码，同时也是蛋白质生物合成的起始信号；起始信号与肽链中的蛋氨酸使用的是两种不同的运送蛋氨酸的tRNA。 蛋白质生物合成过程 蛋白质生物合成过程非常复杂，有近200种成分参加。原核细胞与真核细胞中的合成过程基本相同。 合成过程可以分为四个阶段： ①氨基酸的活化与转运； ②肽链合成的起始； ③肽链的延长； ④肽链的终止。 氨基酸活化 氨基酸的活化实际上是生成氨基酰-tRNA的反应。 特定氨基酸连接在特定tRNA上，不但保证了密码-反密码-氨基酸之间的‘对号入座’；也是保证氨基酸之间肽键顺利形成的活化形式。 催化这一化学反应的酶是氨基酰-tRNA合成酶。此酶具有绝对专一性，酶对氨基酸、tRNA两种底物都能特异识别。 在体内同一氨基酸常有数种与之相适应的tRNA，即一种氨基酸可被几种不同的特异的tRNA所携带；氨基酰-tRNA对氨基酸有严格的特异性，而对于此相适应的数种tRNA无严格的特异性。 氨基酰-tRNA的活化反应 氨基酸活化反应分两步进行： 氨基酰-tRNA的生成 N-甲酰蛋氨酸-tRNA 密码子AUG是蛋氨酸密码，同时用作起始密码； 原核生物的起始密码之能辨认甲酰化的蛋氨酸，即N-甲酰蛋氨酸（fmet）。N-甲酰蛋氨酸-tRNA的生成，是一碳化合物转移和利用过程之一，甲酰基从N10甲酰四氢叶酸转移到蛋氨酸的α-氨基酸上。 真核生物的蛋氨酸转运RNA有至少两种：met-tRNAimet，met-tRNAemet。前者被起始因子eIF-2a特异性识别，后 者可被延长中其催化作用的酶识别。 N-甲酰蛋氨酸-tRNA的形成 起始复合物的生成 翻译起始是把蛋氨酸的起始tRNA连同mRNA结合到核蛋白体上，生成翻译起始复合物（translational initiation complex）。 其生成过程可分以下几个阶段： 1 mRNA在核蛋白体小亚基上就位 在翻译起始密码子AUG的上游，有一个S-D序列，其中心序列是AGGA。在核蛋白体小亚基上的16S-rRNA上有与S-D序列互补的UCCU序列。紧接AGGA的小段核苷酸又可被核蛋