基因工程技术与原理.ppt

　　用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 通过基因工程得到抗虫棉，怎样证明抗虫基因已经在棉花细胞中表达？ 总结：基因工程的操作流程及要点 1为了培育节水高产品种，科学家将大麦中与抗旱节水有关的基因导入小麦，得到转基因小麦，其水分利用率提高了20%。这项技术的遗传学原理是 A．基因重组 B．基因突变 C．基因复制 D．基因分离 巩固练习 2利用苏云金芽孢杆菌的抗虫基因培育的抗虫棉是否成功，最好检测 A．是否有抗生素产生 B．是否有目的基因表达 C．是否有抗虫的性状出现 D．是否能分离到目的基因 巩固练习 3水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中天冬氨酸、甘氨酸和丝氨酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是 A．促使目的基因导入受体细胞 B．促使目的基因在受体细胞内复制 C．使目的基因容易被检测出来 D．使目的基因容易成功表达 巩固练习 4根据mRNA的信息推出获取目的基因的方法是（） A、用DNA探针测出目的基因 B、用mRNA探针测出目的基因 C、用mRNA反转录形成目的基因 D、用PCR技术扩增mRNA 巩固练习 5 PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④　　　　 B、②③④⑤　　　 C、①③④⑤　　 D、①②③⑥ 巩固练习 6 获取目的基因的方法有多种，下列不属于目的基因获取方法的是（） A、从基因组文库中获取 B、从cDNA文库中获取 C、从含目的基因生物细胞中获取 D、利用PCR技术获取 巩固练习 7 下列高科技成果中，根据基因重组原理进行的是（ ） A、我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻。 B、我国科学家将苏云金杆菌的某些基因转移到棉花体内，培育出抗虫棉。 C、我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒。 D、我国科学家通过体细胞克隆技术培育出克隆牛。 巩固练习 8 有关基因工程的叙述正确的是（ ） A、限制性内切酶只在获得目的基因时才使用 B、DNA连接酶可以切断磷酸二酯键 C、质粒都可以做载体 D、基因工程都能定向改变生物的性状 巩固练习 9、下图是利用基因工程办法生产人白细胞干扰素的基本过程图，据图回答：? （1）①过程需要_______________酶的参与。 （2）②物质是从大肠杆菌分离出的_________________。其化学本质是________________，它必须能在宿主细胞中___________________________。 (3)③过程表明目的基因______________________ 专题1 基因工程 第二节 基因工程的原理和技术 基因工程的基本操作程序主要包括 五个基本步骤： 1）获得目的基因 2）形成重组DNA分子 3）将重组DNA分子导入受体细胞 4）筛选含有目的基因的受体细胞 5）目的基因的检测与表达 步骤一：获得目的基因 目的基因是人们所需要转移或改造的基因：如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 目的基因的获得 人工合成 利用PCR技术扩增 从基因文库获得 基因文库 基因组文库 部分基因文库 已知序列 未知序列 1. 人工合成 已知其脱氧核苷酸序列 已知其转录生成的mRNA 的序列 已知其翻译产物（表达产物）的氨基酸序列 2. 聚合酶链式反应（PCR技术） Kary B. Mullis PCR是由美国科学家穆利斯提出的一种体外简化条件下模拟DNA体内复制的DNA快速扩增的方法，此技术获得1993年诺贝尔化学奖。 （1）反应体系 模板 耐热的DNA聚合酶 dNTP：dATP、dGTP、dCTP、dTTP（浓度越高，则酶促反应速度越快，但同时也增加了碱基的错误掺入率和实验成本。） 引物：引物决定PCR扩增产物的特异性和长度 缓冲液 Mg2+（稳定核苷酸和提高聚合酶的活性有直接影响） 1．变性 使双链模板DNA解离为单链结构。变性温度一般为92～96℃。 2．退火 引物与模板互补成双链。退火温度一般为55℃左右。 (由于引物浓度高，序列短，所以易与模板结合。) 3．延伸 在Taq酶（聚合酶）作用下，合成特异DNA序列。延伸温度一般为72℃。 （2）PCR反应过程：变性、退火、延伸 PCR反应曲线 理论上，PCR反应产物呈指数增长，但这种增长形式在扩增25-30个循环以后便放