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第6章-发酵动力学
本章主要内容 分批发酵动力学 连续发酵动力学 补料分批发酵动力学 什么是发酵动力学? 认识发酵过程的规律 优化发酵工艺条件,确定最优发酵过程参数,如:基质浓度、温度、pH、溶氧,等等 提高发酵产量、效率和转化率等 本章的重要性 一条主线: 发酵工艺过程 两个重点: 发酵过程的优化与放大 三个层次: 分子、细胞、反应器 四个目标: 高产、高效、高转化率、低成本 主要方法:基于发酵动力学研究来实现 发酵动力学研究的几个层次(尺度) 分子层次(酶催化与生物转化) 基于关键生化反应(限速步)及其关键酶的动力学特征及其影响因素 采用一系列分子水平的方法 细胞层次(代谢网络与细胞工厂) 基于细胞信号传导、代谢网络、细胞物质运输的系列关键生化反应的综合表现 采用一系列细胞水平的方法,包括细胞群体行为分析 反应器层次(过程工程) 基于细胞群体生长及产物合成对外部环境综合响应 采用一系列优化反应器发酵条件的方法 课程重点:主要针对微生物发酵的表观动力学,通过研究微生物群体的生长、代谢,定量反映细胞群体酶促反应体系的宏观变化速率,主要包括: 细胞生长动力学 底物消耗动力学 产物合成动力学 重点定量研究底物消耗与细胞生长、产物合成的动态关系,分析参数变化速率,优化主要影响因素。 但研究过程中将涉及三个层次的研究方法,达到认识微生物本质特征、解决发酵工业问题的目的。 发酵动力学研究的基本过程 首先研究微生物生长和产物合成限制因子; 建立细胞生长、基质消耗、产物生成模型; 确定模型参数; 实验验证模型的可行性与适用范围; 根据模型实施最优控制。 什么是分批发酵? 分批发酵:准封闭培养,指一次性投料、接种直到发酵结束,属典型的非稳态过程。 分批发酵过程中,微生物生长通常要经历延滞期、对数生长期、衰减期、稳定期(静止期)和衰亡期五个时期。 杀假丝菌素分批发酵动力学分析 分批发酵的优缺点 Monod方程练习题 在一定培养条件下,培养大肠杆菌,测定实验数据如下: 求: (1)该条件下,大肠杆菌的最大比生长速率μmax,半饱和常数Ks (2)比生长速率为μmax时的倍增时间td。 根据发酵时间过程分析,微生物生长与产物合成存在以下三种关系: 与生长相关→生长偶联型 与生长部分相关→生长部分偶联型 与生长不相关→无关联 什么是连续发酵? 连续发酵概念: 在发酵过程中,连续向发酵罐流加培养基,同时以相同流量从发酵罐中取出培养液。 连续发酵特点: 添加培养基的同时,放出等体积发酵液,形成连续生产过程,获得相对稳定的连续发酵状态。 连续发酵类型: 单级 多级连续发酵 连续发酵类型及装置 罐式连续发酵 单级 多级串联 细胞回流式 塞流式连续发酵 两个及以上的发酵罐串联起来,前一级发酵罐的出 料作为下一级发酵罐的进料。 罐式连续发酵实现方法 恒浊法:通过调节营养物的流加速度,利用浊度计检测细胞浓度,使之恒定。 恒化法:保持某一限制性基质在一恒定浓度水平,使菌的比生长速率μ保持一定。 优缺点 添加新鲜培养基,克服养分不足所导致的发酵过程过早结束,延长对数生长期,增加生物量等; 在长时间发酵中,菌种易于发生变异,并容易染上杂菌; 如果操作不当,新加入的培养基与原有培养基不易完全混合。 什么是补料分批发酵? 补料分批培养(Fed-batch culture): 分批发酵过程中补充培养基,不从发酵体系中排出发酵液,使发酵液的体积随着发酵时间逐渐增加 。 概念:在发酵过程中,不连续地向发酵罐内加入培养基,但不取出发酵液的发酵方式。 特点:由于培养基的加入,发酵液体积不断增加。 半连续发酵概念: 在发酵过程中,每隔一定时间,取出一定体积的发酵液,同时在同一时间间隔内加入相等体积的培养基,如此反复进行的发酵方式。 特点: 稀释率、比生长速率以及其它与代谢有关的参数都将发生周期性的变化。 类型 连续流加 补料方式 不连续流加 多周期流加 快速流加 恒速流加 变速流加
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