仪器分析第五章_毛细管电泳教材教学课件.pptVIP

第五章 毛细管电泳;5.1 毛细管电泳的基本原理;经典电泳分析;高效毛细管电泳分析 high performance capillary electrophoresis; 电压：0～30kV； 分离柱不涂敷任何固定液； 紫外或激光诱导荧光检测器； （可检测到：10-19～10-21 mol/L）;高效毛细管电泳的特点（书P144有6点）;5.1.2 高效毛细管电泳(HPCE)基本原理;所以，迁移速度：;3.HPCE中电渗流的大小与方向;HPCE中电渗流的方向;4. HPCE中电渗流的流形;5. HPCE中电渗流的作用;HPCE中影响电渗流的因素 factors influenced electroosmosis;3. 电解质溶液性质的影响;4. 温度的影响;5. 添加剂的影响;HPCE中的参数与关系式 ;3.分离度 ;5.2 高效毛细管电泳仪;仪器流程与主要部件;1.高压电源;3.缓冲液池;毛细管电泳的进样方式; 毛细管一端插入样品瓶，加电压；;5.3 分离模式;一、毛细管区带电泳capillary zone electrophoresis ，CZE;二、毛细管凝胶电泳 capillary gel electrophoresis ，CGE; 1.缓冲溶液中加入离子型表面活性剂，其浓度达到临界浓度，形成一疏水内核、外部带负电的胶束。; 2. 电泳流和电渗流的方向相反，且ν电渗流 ν电泳 ，负电胶束以较慢的速度向负极移动；; 1. 根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术； 2. 毛细管内充有两性电解质（合成的具有不同等电点范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物），当施加直流电压（6～8V）时，管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯度； 3. 氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有关，在酸性溶液中带正电荷，反之带负电荷。在其等电点时，呈电中性，淌度为零；; 4. 聚焦：具有不同等电点的生物试样在电场力的作用下迁移，分别到达满足其等电点pH的位置时，呈电中性，停止移动，形成窄溶质带而相互分离；;5.5 毛细管电泳的应用;阴离子分析;药物分析 analysis of pharmaceutics;采用MEKC模式，鉴定违禁药物；效果优于HPLG法;手性化合物分析;氨基酸与蛋白质分析;蛋白质分析;核酸分析及DNA排序 analysis of nucleic acids and sequence of DNA;新进展advances and special topics;Thank you!