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[农业]活性污泥中微生物分离及生长量检测
活性污泥中微生物 分离及生长量检测 实验性质：综合 实验类别：本科基础实验 实验学时：4 实验教师： 一、实验目的 （1）通过对活性污泥中微生物（主要是细菌） 生长量的检测实验，对微生物菌落形态特征、细菌生长曲线特点及测定原理有所了解。 （2）够熟练使用分光光度计，掌握培养基制备及无菌操作方法、微生物纯种分离，学会用比浊法测定细菌的生长曲线。 二、仪器与材料 实验仪器：高压灭菌锅 721分光光度计 比色杯 恒温摇床 实验材料：活性污泥 肉膏蛋白胨培养基（固体和液体） 无菌水 三、实验原理 采用涂布法将菌液（活性污泥）分散在平板培养基表面，经培养后获得单菌落。 由于细菌菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，本实验采用比浊法，利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，从而了解各菌的生长规律。 四、实验内容 （1）细菌培养基（固体和液体）的制备及灭菌； （2）细菌纯种分离； （3）细菌菌落形态观察； （4）分光光度计的使用及细菌生长（比浊法）的测定。 五、实验步骤 LB培养基（固体和液体）的制备及灭菌。 活性污泥中微生物分离 五、实验步骤 活性污泥生长量检测 六、实验报告 实验结果 细菌生长量的测定： 细菌生长曲线绘制： 以细菌培养时间为横坐标，以所测得的细菌培养液OD（吸光度）值为纵坐标绘制细菌生长曲线。 分析与讨论 对实验结果与存在的问题进行总结与简要分析。 * * 活性污泥梯度稀释 制作平板 灭菌 分装 包扎 称量药品 调pH 溶化 细菌菌落形态观察 37℃恒温培养24小时 涂平板 接入 10mL活性污泥 绘制生长曲线 每隔2h测定培养液OD值 37℃振荡培养 100mL液体培养基 OD600 时间
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