【北京101中学内部】第一章基因工程01.pptVIP

选修 3 第一章 基因工程 gene engineering 基因工程 核心技术： DNA分子重组技术； 把一种生物的基因（外源基因/目的基因）转入另一种生物体（受体）中，使受体（细胞）产生人们需要的基因产物，或新的遗传性状。 思考：如何使大肠杆菌分泌人的胰岛素？ 胰岛素是治疗糖尿病的特效药。一般临床上给病人注射的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每100kg胰腺只能提取1~2g胰岛素，这种方法生产的胰岛素产量低、价格昂贵，远远不能满足需要。 外源基因在宿主细胞中表达的条件： 外源基因稳定地整合到宿主细胞的基因组中 1978年，人的胰岛素基因与大肠杆菌的DNA分子重组成功，并在大肠杆菌体内表达。 生产胰岛素的产量可达100mg/L，相当于从2吨 猪胰腺中提取的量。 1982年，美国开始用基因工程的方法生产的胰岛素，其销售价比之前降低了30%~50% 常用载体 受体细胞 质粒——————细菌 噬菌体—————细菌 动物病毒————动物 植物病毒————植物 基因工程的3大技术保障： 限制性核酸内切酶、 DNA连接酶、 质粒载体的发现与应用，实现了外源目的基因在宿主细胞内的表达。 练 习： 1．科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴的生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是（ ） A．定向提取生物体DNA分子 B．定向对DNA分子进行人工“剪切” C．定向改造生物的遗传性状 D．在生物体外对DNA分子进行改造 2．下列哪项不是基因工程中用来运载目的基因的载体？（ ） A．细菌质粒 B．噬菌体 C、动植物病毒 D．细菌核区的DNA 3．质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（ ） ①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居” A．①③⑤⑦ B．②④⑥ C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦ 4．在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是（ ） A．限制酶和连接酶 B．限制酶和水解酶 C．限制酶和运载体 D．连接酶和运载体 5．有关基因工程的叙述正确的是（ ） A．限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B．重组质粒的形成在细胞内完成 C．质粒都可作运载体 D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 6．科学家将含有人的抗胰蛋白酶基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的羊能分泌含抗胰蛋白酶的奶。这一过程涉及（ ） ①DNA按照碱基互补配对原则自我复制 ②DNA以其一条链为模板合成RNA ③RNA以自身为模板自我复制 ④按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质 A．①③ B．③④ C．①②③ D．①②④ 7．下列关于限制酶的说法不正确的是（ ） A．限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布 B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C．不同的限制酶切割DNA的切点不同 D．限制酶的作用是用来提取目的基因 C D C D A D A * * * * * * * * * * * 小资料 人胰岛素基因（目的基因） 体外重组 重组DNA分子 转化 宿主细胞(受体细胞) 筛选阳性克隆 目的基因在宿主细胞的表达 基因工程的技术路线 载体DNA 目的基因在宿主细胞中表达 基因工程的核心步骤： 目的基因 体外重组 重组DNA分子 载体DNA 基因：具有遗传效应的DNA分子 切割位点 切割位点 基因的剪刀——限制性核酸内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运输工具——载体 “工欲善其事，必先利其器” DNA重组技术的基本工具 专一：一种限制酶只能识别一种特定的 核苷酸序列 限制酶能水解DNA分子的磷酸二酯键 1. 限制性核酸内切酶(Restriction Endonuclease) 识别和切割 DNA分子中的特定核苷酸序列的一类内切酶。 Bam HⅠ GTC CAG G CCTAG GATCC G + GGATCC CCTAGG HindⅡ GTCGAC CAGCTG GAC CTG + 黏性末端 产生两个互补的单链末端 平末端 没有单链突出的平齐末端 目的基因 载体DNA分子 Bam HⅠ Bam HⅠ G CCTAG GATCC G 如何恢复两条DNA片断的 磷酸二酯键？ 2. DNA连接酶（DNA ligase） 将DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，使断开的缺口重新连接。 G CCTAG GA