香菇多糖检测提取分离技术の研究.pdfVIP

摘 要 香菇多糖具有多种生理活性，但用常规的检测方法不能正确地反映出香菇中 的活性多糖，本文利用GPC法检测香菇活性多糖的含量，研究不同产地、贮存稳 定性、粉碎方式、提取方法、pH、干燥方式、脱色处理、醇沉、脱蛋白工艺、浓 缩温度、浓缩方式、灭菌对香菇活性多糖提取的影响，并对提取到的香菇多糖进 行了DEAE一52柱层析分离、SephadexG-200柱层析分离、膜分离纯化。论文的 主要内容和研究结果如下： (1)检测方法的选择：与苯酚一硫酸法相比，GPC法测定时间短，准确度高， 可测定香菇中的活性多糖； 没有明显的差别，均集中在2000000Da左右的位置，河南、湖北、浙江的多糖 含量分别为8．160、3．532、2．209；香菇样品在4℃低温下保藏具有较好的稳定性， 贮藏一个月后仍有较高，但三个月后多糖含量下降较多，常温及40℃下多糖含 量及分子量段均有一定的变化。40CRH75％下保藏三个月后多糖发生明显分解， 小分子糖出现较多； (3)提取条件：浓缩温度、浓缩方式、灭菌对香菇提取的多糖得率影响不 显著；粉碎香菇(40目)样品的香菇含量比掰碎香菇样品高3倍左右，达到2．017％； 回流提取样品中多糖含量明显比水煮提取样品高，微波短时处理对香菇多糖的回 流提取没有明显的影响，碱水回流提取香菇多糖含量有较大提高，活性多糖的含 量比普通回流提取提高了3倍，达到12．398％；冷冻干燥和真空干燥有利香菇多 糖的稳定性，热风干燥过程中，香菇多糖在发生分解； (4)分离结果：未脱色样品香菇多糖含量比脱色样品香菇多糖含量提高了 25．14％，脱色过程中多糖损失较大；醇沉工艺中，浓缩倍数的增大和乙醇浓度提 高，多糖的含量逐渐提高，在浓缩倍数为6倍、乙醇浓度为70％的时，多糖含量 最高；脱蛋白工艺中，ZnSO。质量分数越高，对蛋白的脱除效果越好，当质量分 数达到6％时，蛋白质脱去率趋于最大值，为47．1％，多糖保存率为96．8％。而利 用等电点脱蛋白，在pHl时，对蛋白的脱除效果最好，脱除率达到了60．4％， 但此时的多糖损失比较严重，香菇多糖保存率只有75．6％：香菇多糖经DEAE一52 G-200柱层析后，得到的多糖组分L卜A为单一对称峰， 率较高；L1经Sephadex 糖液很集中地被洗脱，含量为74．19％； 4．886，表明多糖的成分比较复杂，而且还有一部分小分子量多糖未完全透过， 透过液中多糖的分子量比较集中，多分散性为2．514，表明所得多糖比较纯净， 但仍有部分小分子杂质。 关键词：香菇多糖；GPC检测；提取分离；分子量测定 lI Researchofthelentinan detectionand physicochemical properties andthe extractionand separationtechnology DengJianjun ofFood China (CollegeScience，South 51 Agricultural University,Guangzhou 0642，China) Abstract：Lentinanhas a of conventional variety