06细胞内功能区隔与蛋白质分选PPT.ppt

INTRACELLULAR COMPARTMENT AND PROTEINS SORTING;第一节 蛋白质分选的基本原理 第二节 膜泡运输 第三节 内质网 第四节 高尔基体 第五节 溶酶体与过氧化物酶体;定义：结构、功能和发生上相关的内膜形成的细胞结构称为细胞内膜系统。 功能：区隔化；增加表面积。 系统发生上内膜起源于质膜的内陷和内共生。 个体发生上内膜来源于原有内膜系统的分裂，具有epigenetic的特性。;第一节 蛋白质分选的基本原理;一、蛋白质分选信号;二、蛋白质分选运输机制;第二节 胞内膜泡运输;衣被小泡在细胞内沿微管或微丝运输。 与膜泡运输有关的马达蛋白有3类，在这些马达蛋白的牵引下，可将膜泡运到特定的区域。 动力蛋白（dynein），趋向微管负端； 驱动蛋白（kinesin），趋向微管正端； 肌球蛋白（myosin），趋向微丝的正极。;一、衣被类型;三种衣被小泡的功能;（一）笼形蛋白衣被小泡;Clathrin coated vesicles;Deep-etch view of a typical clathrin lattice;Selective transport by clathrin coated vesicles;当衣被小泡形成时，可溶性蛋白dynamin聚集成一圈围绕在芽的柄部，使柄部的膜尽可能地拉近（小于1.5nm），导致膜融合，pinch off衣被小泡。 ;（二）COP I衣被小泡;COP I Vesicles;Cop I and II Vesicles;Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL）;（三）COPⅡ衣被小泡;COP II Vesicles;COPII Coated vesicle;二、衣被形成;ER上形成COPII小泡时，SAR1交换GDP/GTP而激活。 激活的SAR1暴露出脂肪酸链尾巴，插入ER膜，促进衣被蛋白的核化和组装。 SAR1可激活磷脂酶D，将一些磷脂水解，使衣被蛋白牢固地结合在膜上。 当小泡从膜上释放后，衣被很快就解体。;Coat assembly;三、膜泡运输的定向机制;SNAREs;SNAREs in vesicle transport;神经细胞中，SNAREs负责突触小泡的停泊和融合。破伤风毒素和肉毒素能选择性地降解SNAREs，阻断神经传导。 病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合。 ;HIV fusion protein;（二）Rabs;Rabs in docking;四、受体介导的内吞;衣被小窝（coated pits）是质膜内凹的部位，相当于分子过滤器(约占肝细胞表面积2%)。受体、笼形蛋白和衔接蛋白大量集中于此处。 受体胞质端的Tyr-X-X-Φ是衔接蛋白识别的信号，X为任何氨基酸，Φ为分子较大的疏水氨基酸(如Phe、Leu、Met)。 受体同配体结合后启动内化作用，衣被开始组装。;Clathrin coated pit on the cytosolic face of a cell;低密脂蛋白的吸收： 胆固醇主要在肝细胞中合成，以低密脂蛋白（low-density lipoproteins，LDL）释放到血液。 LDL颗粒芯部含有被长链脂肪酸酯化的胆固醇分子。周围由磷脂和胆固醇构成的脂单层包围，有一个较大的Apo-B蛋白（配体）。;LDL Particle;LDL endocytosis;细胞需要胆固醇时，合成LDL跨膜受体蛋白。 受体与LDL颗粒结合后，形成衣被小泡； 进入细胞质的小泡随即脱掉衣被，成为平滑小泡，同早期内体融合，内体中PH值低，使受体与LDL颗粒分离；再经晚期内体将LDL送人溶酶体。 在溶酶体中，LDL被水解成游离的胆固醇。;The receptor-mediated endocytosis of LDL;LDL Endocytosis;受体回收途径： ①大部分返回原来的质膜结构域，如LDL受体； ②有些进入溶酶体被消化，如EGF的受体，称为受体下行调节（receptor down-regulation）； ③有些被运至质膜不同的结构域，形成穿胞运输（transcytosis）。;Transcytosis;五、外排作用;The constitutive and regulated secretory pathways;第三节 内质网;一、形态与组成;RER;SER;膜含60%的蛋白和40%的脂类，PC含量较高，SM含量较少，没有或很少含胆固醇。 约30多种膜结合蛋白，另有30多种位于ER网腔。 葡糖-6-磷酸酶是ER标志酶，核糖体结合糖蛋白（ribophorin）只分布在RER，P450酶系只分布在SER。 ;二、ER的功能;Blobel等（1975）提出信号假说，认为蛋白质N端的信号肽，指导蛋白质转