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4细胞质膜PPT

第四章 细胞质膜;本章内容概要;第一节 细胞质膜的结构模型与基本成分;一、细胞质膜的结构模型;E. Overton 1895 发现凡是溶于脂肪的物质很容易透过植物的细胞膜,而不溶于脂肪的物质不易透过细胞膜,因此推测细胞膜由连续的脂类物质组成。 E. Gorter F. Grendel 1925 用有机溶剂提取了人的红细胞质膜的脂类成分,将其铺展在水面,测出膜脂展开的面积二倍于细胞表面积,因而推测细胞膜由双层脂分子组成。;4、J. D. Robertson 1959 用超薄切片技术获得了清晰的细胞膜照片,显示暗-明-暗三层结构,它由厚约3.5nm的双层脂分子和内外表面各厚约2nm的蛋白质构成,总厚约7.5nm。——单位膜模型;;5、S. J. Singer G. Nicolson 1972 根据免疫荧光技术、冰冻蚀刻技术的研究结果,提出了“流动镶嵌模型”。 ;生物膜的流动镶嵌模型;脂筏结构模型;脂筏(lipid rafts)模型;细胞质膜表面特异性的内陷微区,亦称为细胞质膜微囊、小凹。主要由脂类和蛋白质组成。脂类成分主要包括胆固醇、鞘糖脂、鞘磷脂,这三者构成caveolae的脂质核心。 Caveolae的蛋白质成分主要包括窖蛋白(caveolin)、脂锚定蛋白(如GPI2锚定蛋白)等,其中caveolin是caveolae的表面标记蛋白,是构成caveolae的完整膜蛋白,又称为小凹蛋白。 主要存在于高度分化的细胞,如内皮细胞、上皮细胞、皮纤维细胞、平滑肌细胞、脂肪细胞中尤为丰富。 胞膜窖参与许多细胞生命活动,例如细胞内吞、胆固醇运输、细胞膜组装、信号传导和肿瘤生成等。;二、细胞质膜的化学组成;膜脂;Phospholipids; ;;1、甘油磷脂;;Diphosphatidylglycerol(心磷脂);2、鞘磷脂;(二)糖脂;glycolipids;Glycolipids ;(三)胆固醇;;(四)膜脂分子的运动;(五)脂质体(liposome);;聚乙二醇保护层;膜蛋白;为跨膜蛋白(transmembraneproteins),两性分子。 与膜的结合非常紧密,只有用去垢剂才能从膜上洗涤下来,如离子型去垢剂SDS,非离子型去垢剂Triton-X100等。;整合蛋白的跨膜结构域可以是1至多个疏水的α螺旋,膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。 也可以是跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键,或带负电的氨基酸残基通过Ca2+???Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。 膜蛋白通过胞质侧的半胱氨酸残基与脂肪酸结合,后者插入脂双层。;;;整合蛋白跨膜结构域的作用方式;转运甘油的水孔蛋白;3-磷酸甘油转运蛋白;膜整合蛋白的功能;靠离子键或其它较弱的键与膜表面的蛋白质分子或脂分子的亲水部分结合,因此只要改变溶液的离子强度甚至提高温度就可以从膜上分离下来。 有时很难区分整合蛋白和外周蛋白,主要是因为一个蛋白质可以由多个亚基构成,有的亚基为跨膜蛋白,有的则结合在膜的外部。 功能:为膜蛋白之间、与细胞骨架、胞外基质蛋白之间提供功能与结构上的连接。 ;与糖磷脂酰肌醇(GPI)连接的蛋白,GPI位于细胞膜的外小叶,用磷脂酶C(能识别含肌醇的磷脂)处理细胞,能释放出结合的蛋白。如:细胞表面的受体、酶、G蛋白、细胞粘附分子和引起羊瘙痒病的PrPC都是这类蛋白 另一类脂锚定蛋白与插入质膜内小叶的长碳氢链结合,如Src和Ras蛋白。 ;;整合蛋白,又称内在膜蛋白。; 图中所示是用温和去垢剂溶解,然后纯化,最后重建有功能Na+,K+—ATP酶的实验过程 实验中要分离纯化Na+,K+—ATP酶,然后将它掺入到磷脂小泡;第二节 细胞质膜的基本特征和功能;一、膜的流动性;(一)膜脂的流动性;(二)膜蛋白的分子运动;利用细胞融合技术观察蛋白质运动 ;成斑现象:荧光抗体标记时间足够长,均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新排布,聚集在细胞表面的某些位置,即成斑现象。 成帽现象:标记荧光聚集在细胞的一端,即成帽现象。 成斑与成帽现象显示了膜蛋白的流动性。 二价抗体分子可使相邻的膜蛋白分子相互交联,随着细胞的运动而聚集在细胞的一端。;(三)膜流动性的生理意义;二、膜的不对称性;EF;膜脂的不对称性:同一种脂分子在脂双层中呈不均匀分布。如:PC和SM主要分布在外小叶,PE和PS分布在内小叶。用磷脂酶处理完整的人类红细胞,80%的PC降解,PE和PS分别只有20%和10%的被降解。 膜脂的不对称性还表现在膜表面具有胆固醇和鞘磷脂等形成的微结构域——脂筏。;;膜蛋白的不对称性:每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有特定的方向性和分布的区域性。如各种激素的受体具有极性,细胞色素C位于线粒体内膜M侧。 复

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